那蛋白就都轉到濾紙上去了,沒有到膜上。你找點麗春紅染染膜看看,估計膜上什么也沒有哇。不用往下做了。當然,如果你在膜上看到預染Marker了,還是值得再去嘗試一下的。
VDF膜一定要在純甲醇里浸潤的!不然蛋白結合不上去。在100%甲醇里短暫浸潤,其目的是為了活化PVDF膜上面的正電基團,使它更容易跟帶負電的蛋白質結合。小分子及大分子量的蛋白轉移時,多加或不加甲醇也是......