今天我們探討的是PCR實驗室最容易忽視的環節，對試驗輔料進行質檢。PCR實驗室的輔料指的是PCR實驗中常用的一些輔助試劑和耗材，比如采樣管、拭子、離心管、PCR管、吸頭、移液器、無核酸酶水和試管架等。
輔料的質檢通常是在新一批的輔料到實驗室后統一做一次或者定期（半年或1年）做，因此質檢就包含了驗貨和質檢2個部分。由于輔料的質檢沒有一個統一的標準，一般由各實驗室自行制定，可簡可繁，這里提出一些方法供大家參考和批評指正。
1.外包裝檢查：外包裝應完整無損無污，標識清楚，檢查品名、品牌，貨號，規格、生產日期，有效期、保存條件等信息。
2.內包裝檢查：內包裝物品應與外包裝標識一致，檢查是否有破損，泄漏，內容物是否齊全，是否有相應的使用說明書等。
3.性能質檢：檢測試劑耗材是否與其性能一致，比如吸頭的準確性和氣密性等
4.污染物質檢：檢測試劑耗材是否被常規檢測項目的待檢物污染，這種污染可能是物品生產環節，也可能是運輸或實驗室的保存過程中被污染。
5.抑制物質檢：檢測試劑耗材中是否存在PCR反應的抑制物，比如核酸酶。二.輔料質檢的前提條件
1.弱陽性質控：需要準備弱陽性質控，包括標準物質、第三方質控或弱陽性樣品用于進行性能質控和抑制物質控。
2.陰性質控：需要準備確定陰性的樣品或空白對照，用于進行污染物的質控。
3.重復次數n：中國人喜歡3(三顧茅廬),6（六六大順）,8（發發發）,9（九九歸一），很遺憾這些數和實驗室都關系不太大。符合統計學計算的最常用的兩個數字是5和20,5通常是能進行統計學分析的最少重復次數，20通常用于計算95%的置信區間。大家根據自己的需要選擇合適的重復次數。
三.常見輔料的質檢
輔料的質檢應結合實際工作中可能用到的場景，并非越苛刻越好，需要每個實驗室結合自身情況來設計和調整文中提到的參數。
1.離心管
（1）滲漏密閉性：將n個離心管加入半量墨汁，蓋好蓋子后放入水中，浸泡30min，沒有墨汁滲出為合格。
（2）離心密閉性：將n個離心管加入半量純水，放入離心機，10000 rpm，30min，管蓋未崩開未漏液為合格。
（3）熱密閉性：將n個離心管加入半量純水，蓋好蓋子稱重后放入金屬浴中，65℃或90℃（巴氏消毒），30min，再進行稱重，離心管未變形，管蓋未崩開未漏液，前后重量未變化為合格。。
（4）冷密閉性：將n個離心管加入半量純水，放入-20℃冰箱，24h，離心管未變形，管蓋未崩開未漏液為合格。
（5）污染物質檢：將n個離心管分別加入半量陰性純水，蓋好蓋子渦旋1 min后靜置5min，吸取純水作為模板進行擴增，qPCR無擴增為合格。
（6）抑制物質檢：將n個離心管分別加入弱陽性質控物,室溫靜置5min，然后進行提取;RNA核酸，DNA核酸，室溫靜置5min，作為模板進行擴增，qPCR擴增未被抑制為合格。
2.PCR管
（1）滲漏密閉性：將n個PCR管加入半量墨汁，蓋好蓋子后放入水中，浸泡30min，沒有墨汁滲出為合格。
（2）離心密閉性：將n個PCR管加入半量純水，放入離心機，1000 rpm，30min，管蓋未崩開未漏液為合格。
（3）熱密閉性：將n個PCR管加入半量純水，蓋好蓋子稱重后放入PCR儀，設置一個常用的PCR程序，程序運行完畢后，再進行稱重，PCR管未變形，管蓋未崩開未漏液，前后重量未變化為合格。。
（4）冷密閉性：將n個PCR管加入半量純水，放入-20℃冰箱，24h，離心管未變形，管蓋未崩開未漏液為合格。
（5）污染物質檢：將n個PCR管加入半量陰性純水，蓋好蓋子渦旋1 min后靜置5min，作為模板進行擴增，qPCR無擴增為合格。
（6）抑制物質檢：將n個PCR管分別加入弱陽性質控物,室溫靜置5min，然后進行提取;RNA核酸，DNA核酸，室溫靜置5min，作為模板進行擴增，qPCR擴增未被抑制為合格。
（7）空白熒光通透性：對于qPCR,需要考察PCR管是否有非特異性熒光信號，將n個空PCR管，蓋好蓋子后放入PCR儀，設置一個常用的PCR程序，程序運行完畢后，qPCR無擴增為合格。
（8）陽性熒光通透性：對于qPCR,還需要考察PCR管是否會抑制熒光的通透性，將n個含弱陽性樣品和擴增試劑的PCR管，與確認無熒光干擾的PCR管，蓋好蓋子后放入PCR儀一同擴增，設置一個常用的PCR程序，程序運行完畢后，qPCR擴增未被抑制為合格。
