Nature子刊：CRISPR在癌癥研究中的新應用

　　p53是最早發現也是最重要的腫瘤抑制子之一，被稱為基因組的守護者。這種蛋白可以作為轉錄因子在細胞核中起作用，通過控制特定基因的表達，在細胞周期、DNA修復和細胞凋亡等重要過程中發揮關鍵作用。

　　Mdm2失活p53是癌癥中最常見的事件之一，因此用化合物靶標p53-Mdm2互作是很有前景的癌癥治療策略。不過，人們對p53激活藥物面對的抵抗機制還知之甚少。

　　德國馬爾堡Philipps大學的研究人員建立了以CRISPR-Cas9為基礎的靶點確證方法，并在肺癌和結腸直腸癌中進行了研究。這項研究前不久發表在Nature Chemical Biology雜志上，文章的通訊作者是馬爾堡Philipps大學的Thorsten Stiewe。

　　規律成簇的間隔短回文重復CRISPR與內切酶Cas9，原本是細菌抵御病毒的重要武器。現在它們已經成為了基礎研究、分子治療和作物改良中的有力工具，幫助人們在多種生物中進行基因組編輯，包括人、小鼠、大鼠、斑馬魚、秀麗隱桿線蟲、植物以及細菌。CRISPR/Cas體系包括一個稱為Cas9的DNA剪切酶，和一段與目標DNA片段匹配的引導性短RNA（gRNA）。Cas9內切酶在gRNA的引導下切割特定的DNA位點，引入多個gRNA可以同時修飾多個基因實現多重基因編輯。

　　研究人員發現，nutlin的活性嚴格依賴功能性p53，這種化合物能阻斷Mdm2的p53結合區域。藥物RITA的效力與DNA損傷有關，這種藥物結合在與Mdm2互作的p53 N端。研究顯示，抵抗RITA的細胞對DNA交聯劑cisplatin也有抗性，這些細胞具有更強的DNA交聯修復。通過mTOR抑制劑或RNA干涉對FancD2進行抑制，可以恢復細胞對RITA的敏感性。

　　這項研究表明，癌癥對不同化合物有特異性的抵抗機制，這大大限制了細胞對p53激活藥物的應答。以CRISPR-Cas9為基礎的靶點確證技術可以解析上述問題，幫助人們在癌癥治療中用p53激活藥物獲得更好的效果。