黃化豌豆幼苗的“三重反應”實驗

實驗方法原理：乙烯是一種氣體激素，它對植物的代謝，生長和發育有著多方面的作用。用乙烯氣體處理黃化的豌豆幼苗，可抑制幼苗上胚軸的伸長，并使上胚軸發生膨大及橫向生長。黃化幼苗對乙烯的這三種反應被稱為“三種反應”，并可作為對乙烯的一種診斷性鑒定方法。

這種方法是根據乙烯的主要生理作用建立的。據報導，乙烯可使細胞壁內表面在縱向方向沉積的微纖維增多，這樣就限制了細胞的縱向延伸，加強了細胞的橫向擴大，從而表現出上胚軸伸長受限制及橫向膨大現象。橫向生長是由于乙烯抑制了生長素從上胚軸靠上一邊向靠下一邊的側向運輸，使靠上一邊比靠下一邊有較多的生長素，因而生長較快所造成。這種上下生長的差別，被稱為“偏上性”（epinasty）生長，是乙烯及其類似物（如乙炔，丙烯等）及可產生乙烯的物質（如生長素類物質）所特有的反應。該反應敏感（低濃度即有反應），發生迅速，成為最早被應用的一種乙烯生物鑒定法。

現代則多用氣相色譜對乙烯進行定量測定，但有時需和生物測定配合應用。

實驗材料：黃化豌豆幼苗    

試劑、試劑盒：乙烯氣體  

儀器、耗材：

花盆                                                                 

蛭石                                                                  

架子                                                                  

黑布罩                                                                  

玻璃試管                                                                 

加橡皮塞                                                                  

濾紙 

實驗步驟：

一、材料和方法

第一階段：黃化豌豆幼苗的培育

儀器設備

花盆，蛭石，架子，黑布罩，玻璃試管直徑約4cm ，長約20cm ，加橡皮塞，每組10個，濾紙，乙烯氣體或乙烯利溶液10^－1，10^－2，10^－3，10^－4 M，注射器，量筒100 MM ³，10 MM ³，暗柜

二、實驗步驟

1．將精選的豌豆種子放在過飽和漂白粉溶液中浸泡15分鐘，放在干凈的紗布袋中，在流動的自來水中吸漲一天。

2．將種子播在放有蛭石的花盆中，放在25℃，黑暗條件下生長。

3．在黃化豌豆幼苗生長到約4cm 時（約一周）可用做試驗。

4．先用水充滿試管，再將水倒于量筒中以測量試管的實際體積；

5．將試管洗凈，用少量酒精洗滌，在試管底部作一濾紙橋；

濾紙橋做法：將濾紙剪成寬約1.2cm ，長約10cm 的長條，在濾紙中部挖一小洞，洞的大小可允許豌豆苗穿過即可，將濾紙疊成三折放入試管。

6．將豌豆幼苗從濾紙洞中插入，使根部泡于水中，然后將試管用橡皮塞塞緊；

7．根據測得的試管體積計算，用注射器注入相應的乙烯氣體，使在試管內的乙烯氣體濃度分別為0，0.5，1.5，10pp M 。

以上步驟6－7要盡可能在完全光下進行。

8．將一組試管（不同濃度的處理）放在25℃黑暗條件下2天；另一組放在光照條件下（200－500尺燭光）2天后進行觀察記載。

二，觀察和記載

1．測量并記載上述不同濃度乙烯處理的幼苗長度，以濃度為橫坐標，長度為縱坐標繪圖；

2．繪圖表示不同濃度的乙烯處理對黃化豌豆幼苗形態的效應。