實驗方法原理
馬丁氏培養基是一種用來分離真菌的選擇性培養基。此培養基是由葡萄糖、蛋白胨、K2HPO4、MgS04·7H2O、孟加拉紅(玫瑰紅,Rose Bengal)和鏈霉素等組成,其中葡萄糖主要作為碳源,蛋白胨主要作為氮源,K2HPO4、MgS04·7H2O作為無機鹽,為微生物提供鉀、磷、鎂離子。
這種培養基的特點是培養基中加人的孟加拉紅和鏈霉素能有效的抑制細菌和放線菌的生長,而對真菌無抑制作用,因而真菌在這種培養基上可以得到優勢生長,從而達到分離真菌的目的。
試劑、試劑盒 葡萄糖蛋白胨K2HPO4MgS04·7H2O孟加拉紅鏈霉素瓊脂
儀器、耗材 試管三角燒瓶燒杯量筒玻棒培養基分裝器天平牛角匙高壓蒸氣滅菌鍋
實驗步驟
一、馬丁氏培養基配方
此培養液1 000 ml加1%孟加拉紅水溶液3.3 ml。
臨用時以無菌操作在100 ml培養基中加入1%的鏈霉素0.3 ml使其終濃度為30 μg/ml。
二、器材
1. 溶液或試劑
K2HPO4,MgS04·7H2O,蛋白胨,葡萄糖,瓊脂,孟加拉紅(1%的水溶液), 鏈霉素(1%水溶液)。
2. 儀器或其他用具
試管,三角燒瓶,燒杯,量筒,玻棒,培養基分裝器,天平,牛角匙,高壓蒸氣滅菌鍋等。
三、操作步驟
1. 稱量和溶化
按培養基配方,準確稱取各成分,并將各成分依次溶化在少于所需要的水量中。將各成分完全溶化后,補足水分到所需體積,再將孟加拉紅配成1%的溶液,在1 000 ml培養基中加人1%的孟加拉紅溶液3.3 ml,混勻后,加人瓊脂加熱溶化(方法同馬丁氏培養基的制備實驗)
2. 分裝、加塞、包扎、滅菌、無菌檢查
與馬丁氏培養基的制備實驗相同。
3. 鏈霉素的加人
將鏈霉素配成1%的溶液,在100 ml培養基中加1%鏈霉素液0.3 ml,使每毫升培養基中含鏈霉素30 μg。
由于鏈霉素加熱容易分解,所以使用時,將培養基溶化后待溫度降至45-55 ℃時才能加入。