實驗原理
帶電荷的蛋白質，在電場中向著與其所帶電荷電性相反的電極泳動稱為電泳。血清中各種蛋白質的等電點不同，但大都在pH7以下，若將血清置于pH8.6的緩沖液中，則這些蛋白質均帶負電，在電場中都向陽極移動。由于各種蛋白質在同一pH環境中所帶負電荷多少及分子大小不同，所以在電場中向陽極泳動速度也不同。蛋白質分子小而帶電荷多者，泳動速度快；反之，則泳動速度慢。因此可將血清蛋白質依次分為清蛋白、a1-球蛋白、a2-球蛋白、b-球蛋白和g球蛋白五條區帶，經染色可計算出各血清蛋白質含量的百分數。
以醋酸纖維薄膜（CAM）為支持介質，電泳分離后經染色處理，可展示出清晰的蛋白質電泳圖譜。由于染色時染料與蛋白質的結合與蛋白質的量成正比，因此將各蛋白質帶剪下，分別用一定量的NaOH稀溶液洗脫下來，即可進行比色，測定出各蛋白質區帶的相對含量。也可用一定量的有機溶劑使CAM溶解制成透明膜而用光密度計進行掃描定量。
醋酸纖維薄膜電泳具有微量、快速、簡便及分辨率較高等優點，廣泛應用于血清蛋白、血紅蛋白、脂蛋白、同工酶的分離和測定。
實驗試劑
1．巴比妥—巴比妥鈉緩沖液(pH8.6，m=0.06)。稱取巴比妥2.21克和巴比妥鈉12.36克，溶于500毫升蒸餾水中，加熱溶解。待冷至室溫后，再加蒸餾水稀釋至1000毫升。
2．染色液
（1）麗春紅S染色液：稱取麗春紅S O.4g、三氯醋酸6g，用蒸溜水溶解并稀釋至100ml。
（2）氨基黑10B染色液：稱取氨基黑（C22H13O12N6S3Na3）10B 0.1g,溶于20ml無水乙醇中，加冰醋酸5ml,使其溶解。另取磺基水楊酸2.5g，溶于少量的蒸餾水中，加入前液將兩液混合搖勻，再以蒸餾水補足至100ml。稱取麗春紅S0.4克及三氯醋酸6克；用蒸餾水溶解，并稀釋至100毫升。
3．漂洗液。
（1）3％（V／V）醋酸溶液：適用于麗春紅S染色的漂洗。
（2）甲醇45ml、冰醋酸5ml、蒸餾水50ml混勻，適用于氨基黑10B染色的漂洗。
4．透明液 取無水乙醇75毫升和冰醋酸25毫升混勻備用。
5．洗脫液
（1）0.1mol/L NaOH溶液：用于麗春紅S染色的洗脫。
（2）0.4mol/L NaOH溶液：用于氨基黑10B染色的洗脫。
6．40%(V／V)醋酸溶液。
實驗設備 電泳儀、電泳槽、分光光度計或光密度儀。
實驗材料 醋酸纖維薄膜、培養皿、濾紙、鑷子、點樣器、直尺、鉛筆、剪刀等。
實驗步驟
1、電泳槽的準備
將巴比妥－巴比妥鈉緩沖液加入電泳槽中（兩側槽內注入等量的緩沖液），調節兩側內的緩沖液，使其在同一水平面，液面與支架的距離約為2～2.5cm。支架寬度到恰好適合CAM的長度，用3～4層濾紙或4層紗布搭橋。
2、CAM準備
取醋纖薄膜(2厘米*8厘米)在CAM的無光澤面（涂有醋酸纖維素）距一端1.5cm處用直尺和鉛筆輕劃一線（與CAM的長軸垂直），作點樣標記，將膜條編號后將無光澤面朝下浸入巴比妥－巴比妥鈉緩沖液中，待充分浸透后取出（一般約需求20～30min），夾于潔凈的濾紙中,吸去多余的緩沖液。
3、點樣
用血清加樣器將3－5ul無溶血的新鮮血清均勻地點在劃線處，樣品應與膜的邊緣保持一定距離，以免電泳圖譜中的蛋白區帶變形。待血清滲入膜后移開點樣器。點樣應注意，要適量、均勻和垂直，并避免弄破薄膜。
4、平衡
將已點樣的薄膜加樣面朝下，點樣端置于陰極端，將膜條緊貼于電泳槽支架的鹽橋上并保持平直，橋的另一端垂入緩沖液中，鹽橋將膜的兩端與緩沖液連通，加上槽蓋平衡5min后通電電泳。
5、電泳
正確聯接電泳槽與整流器對應的正負極，點樣側接負極，另一側接正極。開啟電源通電。調節電壓10V～15V/cm膜長,電流0.4～0.6mA/cm膜總寬，電泳40－60分鐘（通常夏季需45min,冬季需60min），待電泳區帶展開3.5cm～4cm時即可關閉電源。