標記方法應符合：技術方法簡單、產率高，且重復性好；標記反應不影響酶和抗原或抗體的活性；酶標志物穩定，應避免酶、抗體（抗原）以及酶標志物各自形成聚合物等。
1.戊二醛交聯法：同源雙功能交聯劑
（1）一步法：連接AP。
①優點：操作簡便、有效，重復性好。
②缺點：交聯時分子間比例不嚴格，大小不一，影響效果。
（2）二步法：連接HRP。
先將HRP與戊二醛作用，透析除去戊二醛，在pH9.5緩沖液中再與抗體作用而形成酶標抗體。
優點：酶標志物質量較均一，標記效率也較一步法高。
2.改良過碘酸鈉法
HRP標記抗體或抗原的最常用方法。