酶與抗原特異性杭體偶聯后，可通過ELISA或免疫印跡反應來檢測抗原。辣恨過氧化物酶和堿性磷酸酶的偶聯物可用于上述兩種檢測實驗中， 它們均可檢測1~10 mg/ml 的抗原，而后一種檢測方法則更為穩定。
| 實驗材料 | 抗體 |
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| 試劑、試劑盒 | 磷酸鈉HRPO碳酸鹽緩沖液過碘酸鈉SASTrisEDTABSA甘油 |
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| 儀器、耗材 | 透析膜離心機 |
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| 實驗步驟 | 1. 透析5 mg/ml 抗體溶液，除使用PBS之外，其方法與基本方案中的步驟1完全相同。透析完畢，將抗體溶液置于一個試管中，并測A280處吸光度。用PBS將其稀釋至3 mg/ml。 2. 往一個1. 5 ml 的微量離心管中加入3 mg/ml 的抗體溶液100 堿性磷酸酶90 μl。再加入5 μl 的25%戊二醛，溫和地混勻，置于室溫下備用.
3. 于0、5、10、15、30、60及120 min 時分別取出25 μl 小份反應液，分別置于獨立的1.5 ml 微量離心管中（冰浴），各加125 μl PBS，然后各加1.1 ml Tris/卵清蛋白緩沖液。 4. 透析樣品，方法同步驟1。用直接ELISA法檢測樣品中的堿性磷酸酶的活性，以確定最佳的交聯時間。采用最佳交聯時間重復步驟1~3。
5. 加入疊氮化鈉至終濃度0.1%，于4℃避光可保存約1年，或加等體枳的甘油，于 - 20℃可保存約1年。
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