主體內容:
1.反相填料
活化:
1)用3-5ml甲醇沖洗填料。
2)用3-5ml水或緩沖液沖洗,上樣前勿讓填料流干。
上樣:
樣品加到柱床上,以1-5ml/min.低流速通過填料。若所需樣品不會被保留,此時應收集樣品作分析。
洗脫:
如果樣品被保留,使用約5ml極性溶劑(如水、緩沖液或有機溶劑/水混合液)將弱保留干擾物洗出。
收集:
用1-2ml非極性溶劑將所需物質洗脫,收集用于分析。
2.正相填料
活化:
用3-5ml非極性溶劑沖洗填料
上樣:
樣品加到柱床上,以1-5ml/min.低流速通過填料。若所需樣品不會被保留,此時應收集樣品作分析。
洗脫:
如果樣品被保留,使用約5ml非極性溶劑將弱保留干擾物洗出。
收集:
用1-2ml極性溶劑將所需物質洗脫,收集用于分析。
3.離子交換填料
活化:
用5ml去離子水或低離子強度緩沖液(0.001M-0.01M)沖洗填料
上樣:
樣品加到柱床上,以1-5ml/min.低流速通過填料。若所需樣品不會被保留,此時應收集樣品作分析。
沖洗:
如果樣品被保留,使用約5ml去離子水或低離子強度緩沖液將弱保留干擾物洗出。
收集:
用1-5ml高濃度緩沖液(0.1-0.5M) ,或以緩沖液改變pH,使得樣品不再離子化,將所需物質洗脫,收集用于分析。
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