質譜守望健康，SCIEX獸藥殘留的完整解決方案

我國是世界上獸藥生產和使用大國，同時獸藥殘留的危害日益嚴重，導致了毒理作用、動物源細菌耐藥性、誘導變態反應以及環境污染等危害，因此禽、獸肉目前國家監管日趨嚴格。

目前獸藥殘留監管主要體現在動物源性食品、飼料等多個層面的安全監管、風險控制以及相關的科學研究等多個層面。安全監管方面，主要體現在農業農村部、國家衛生健康委員會和國家市場監督管理總局公告2019年第114號，《食品安全國家標準 食品中獸藥最大殘留限量》( GB 31650. -2019) 。食品安全國家標準等食品安全國家標準頒布實施。風險控制方面主要體現農業農村部第676號公告發布了《飼料中風險物質的目標物篩查與確認液相色譜–高分辨質譜法》等一系列篩查檢測方法的陸續頒布實施。科研前瞻方面主要體現在，獸藥代謝、降解等多個方面的研究。

復雜基質是目前獸藥檢測較大的影響因素，一直困擾著獸藥檢測的各項工作。為了應對目前獸藥檢測的需求，SCIEX推出了從標準覆蓋、風險控制、科研前瞻、復雜基質特色方案等四個維度的方案，極大的方便了檢驗檢測科研的需求。

一、標準覆蓋

SCIEX 基于三重四極桿質譜開發了一系列的獸藥檢測方案，針對現行的國標或行標開發配套的拿來即用的方法，方便日常檢測和滿足擴項的需求。

方案覆蓋全而廣：定量方法覆蓋現行所有的標準，包含了農業農村部公告388、594、676號等多個公告；高度覆蓋了《食品安全國家標準 食品中獸藥最大殘留限量》( GB 31650. -2019)限用目錄，農業農村部250公告禁用獸藥目錄，獸藥典以及目前獸藥研究的熱點化合物。

多重驗證：涉及方案均進行了相關標準多個基質的驗證；每個方案均多次在客戶端與客戶合作完成驗證，重復性更好。

前處理方案完備：前處理嚴格按照標準進行驗證，對每一個標準的注意事項進行總結和歸納。

靈敏度和重現性：Turbo V^?離子源，高壓聚焦Q0和QJet離子導入技術結合LINAC^? 線性加速碰撞池技術和脈沖計數檢測器技術，提供更加穩定的數據和更低的靈敏度和強大的抗復雜基質干擾保障。

1. GB 31650系列標準-農業農村部388、594公告對標方案

本文采用高效液相色譜串聯質譜建立了對于新頒布中華人民共和國農業農村部公告第388、594號公告所中液質標準和液質能檢測的項目進行了方案開發。

該方案涵蓋了GB 31658系列、GB 31656系列、GB 31657系列、GB 31659系列、GB 31613多個系列50多個標準。

本方案內容詳盡，經過多方驗證、多基質驗證，涵蓋液相方法和質譜方法同時提供了各個標準的前處理注意事項等，保障了方法的適用性，保障客戶拿來即用。

圖1. 詳盡方案設計

圖2. 方案內容

2. 農業農村部第676號公告《飼料中風險物質的目標物篩查與確認 液相色譜–高分辨質譜法》對標方案

農業農村部第676號公告發布了《飼料中風險物質的目標物篩查與確認 液相色譜–高分辨質譜法》檢測方法。SCIEX針對該標準建立了飼料產品中447種化學風險物質高通量快速篩查與確認的解決方案。

本方案包括液相方法、質譜方法、一級篩查列表、二級譜庫。操作簡單快速，結果判定方便準確，免去方法開發的時間，拿來即用，省時省力。

圖3. 447種化學風險物質提取離子流圖

（左：反相色譜ESI+；中：反相色譜ESI-；右：HILIC色譜ESI+）

二、風險評估

除對標的方案外，為了幫助客戶更好的進行風險評估，SCIEX 基于QTOF 質譜和QTRAP 質譜分別建立了完整的高通量篩查和定量方案。

1）QTOF方案包括630種化合物的液相條件，質譜條件、保留時間、二級譜庫、帶有加合離子的一級篩查列表。其中高分辨標準譜庫除了包含630多種獸藥的電子誘導解離（CID）二級譜外，還包括240多種化合物的電子激活解離（EAD）碎裂技術的二級譜。

2）QTRAP方案包括360種化合物的液相條件，保留時間、MRM參數以及二級譜庫。兩套方案均可以拿來即用。

1. 應用高分辨質譜（QTOF）高通量篩查630種獸藥殘留

依賴超快的掃描速度結合動態背景扣除（DBS）技術：一針進樣同時得到樣品高質量的一級MS和二級MS/MS質譜信息。

本方法包含630種獸藥，涵蓋GB 31650規定的所有化合物，同時囊括了還包含國內外研究熱點覆蓋30多類各種不同用途獸藥。方案并在豬肉基質、可食用組織、雞蛋、水產品、蜂蜜、牛奶、動物尿液等多個產品中進行了驗證；方案提供完整的一級篩查列表與多能量的二級數據庫；CID譜庫和EAD譜庫，并且該獸殘篩查方案還在不斷更新擴展。

圖4. 630種獸藥提取離子流圖

（左：反相色譜ESI+；中：反相色譜ESI-；右：HILIC色譜ESI+）

2. QTRAP實現同時定性和定量分析篩查360余種獸藥殘留

獨有的QTRAP技術應用于科研：基于多反應監測-信息依賴-增強子離子技術（MRM-IDA-EPI）采集方式及譜庫檢索技術，通過化合物的保留時間、離子對豐度比以及EPI標準譜庫檢索對比，進行高通量獸藥的快速篩查和確證；

360多種獸藥定量大方案包含了目前獸藥領域絕大多數藥物，除了完整的方法和譜庫外，還提供標液配置、儲存，前處理，儀器測試等多個方面的詳盡信息，并在豬肉基質、可食用組織、雞蛋、水產品等多個產品中進行了驗證，并且該獸殘篩查方案還在不斷更新擴展。

提取離子流圖如下：

圖5. 360種獸藥提取離子流圖（上圖：ESI+；下圖：ESI-）

圖6. 豬肉樣MRM_IDA_EPI同時定量和定性

三、科研前瞻——獸藥代謝產物鑒定

除獸藥化合物原型外，獸藥代謝研究是目前獸藥研究的熱點，主要通過研究母藥的代謝途徑和動物體內的I相、II相代謝物，從而研究藥物在動物體內的變化，為獸藥研究、食品安全監管提供一手的科研數據。

SCIEX提供兩種解決方案：

1）QTRAP結合LightSight軟件：基于QTRAP系統結合動物體內的I相、II相代謝物，利用LightSight進行代謝物鑒定，從而研究藥物在動物體內的變化，為獸藥研究提供有力的依據。

2）QTOF結合Molecule Profiler 軟件：進行代謝物和降解產物的研究：基于高分辨質譜數據，以及括I相II相代謝規律，結合母藥的二級碎片信息，利用Molecule Profiler 軟件完成母藥的代謝物鑒定工作

1. QTRAP技術結合LightSight應用與獸藥代謝研究

示例：QTRAP技術結合LightSight用于可樂定酮代謝產物鑒定

利用LightSight通過pMRM(+)_IDA_EPI(+)發現的代謝物最終鑒定到10種可樂定代謝產物。

圖7. 基于LightSight進行可樂定代謝產物鑒定。

方案結合QTRAP質譜強大的EPI富集二級質譜，實現超過三重四極桿兩個數量級以上的二級靈敏度，用于結構解析，特別在低濃度樣品LightSight軟件模塊化流程化的鑒定方式，快速、高效、靈敏度高。

2．高分辨結合Molecule Profiler軟件代謝物鑒定

示例：高分辨結合Molecule Profiler軟件用于赭曲霉毒素代謝物鑒定

赭曲霉毒素為飼料中帶入動物體內，在獸藥檢測過程中常困擾日常監測，因為飼料被動物食用后代謝為其他產物，從而產生危害，因此赭曲霉毒素A（Ochratoxin A，OTA）OTA的代謝物研究對于動物飼料安全至關重要。

Molecule Profiler通過對代謝途徑的預測，包括I相II相代謝的發生，結合母藥的二級碎片信息，Molecule Profiler 軟件可以幫助預測和解析代謝物的結構，進而完成母藥的代謝物鑒定工作。舉例如下：

圖8. 基于Molecule Profiler進行赭曲霉毒素代謝產物鑒定

圖9.  赭曲霉毒素產物鑒定

四、復雜基質特色方案——MRM³定量和SelexION離子淌度定量方案

對于復雜基質，如蹄筋、肝臟等動物源食品，常會遇到本底有干擾或者基線高、靈敏度差的情況，SCIEX 對于復雜基質樣本提供兩種優異的解決方案：  

1）應用QTRAP質譜MRM³即孫離子定量顯著提高專屬性，降低基線噪音，提升靈敏度的同時降低基質干擾，減少假陽性干概率。

2）應用SelexION離子淌度技術降低干擾和進行同分異構體分離： SelexION技術增加了新一維度的分離，在同分異構的分離，減少基質中的干擾物及降低背景噪音方面均能起到良好的效果，從而更準確定量。

1. 高選擇性MRM³檢測復雜動物性食品中獸藥殘留