AS的診斷依據需要根據患者的易感性、病史、臨床特征和影像學結果進行綜合考慮的。最常用的診斷標準是所謂的紐約標準：
1.腰椎前曲、側彎、后仰3個方向皆受限。
2.腰椎或背腰交接處疼痛史持續3個月以上
3.胸擴受限，取第4肋間隙測量，胸擴≤2.5cm。
還可根據骶髂關節X線改變的分級（0級正常；1級可疑；2級輕微改變，小的局限區有侵襲或硬化，但關節腔寬度無改變；3級肯定或中度異常，出現侵襲、硬化、關節腔增寬或狹窄或部分強直；4級重度異常，關節全部強直）來判斷。骶髂關節改變雙側3或4級，并有上述3項中之1項者可確診。骶髂關節改變3或4級，但只1側，或改變2級2側，并有上述第1或第2項及第3項者也可確診；骶髂關節改變3或4級雙側，但無上述3項中之任何1項者，作為疑診病例。以上標準對診斷有一定幫助，但應全部考慮后決定。HLA-B27不能作為AS的篩選檢查，因為大多數HLA-B27陽性的人并無AS，而某些AS患者HLA-B27則陰性。當臨床疑診AS而影像學難以確診骶髂關節炎時，HLA-B27可增加AS診斷的可能性，但仍不能確診。