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    發布時間:2018-08-20 17:31 原文鏈接: 血細胞分析儀嗜堿性粒細胞計數假性減少一例

    概要:在血常規檢驗工作中嗜堿粒細胞正常或減少無臨床意義,增多非常少見,假性增多曾有報道;而嗜堿性粒細胞本應增多,但實際檢測結果不高或假性減少則非常罕見,甚至未見報道。


    血細胞分析儀已經成為血常規檢驗必用的實驗手段,特別是具有五分類能力的血細胞分析儀,目前已經非常廣泛的應用,而且基本能夠滿足臨床診斷及實驗室求。但是由于血細胞分析儀依然具有部分設計缺陷,并不能在一些檢測項目上給出非常確切的結果,甚至可能導致檢測錯誤或漏檢,因此制定嚴格的復檢規則非常必要。國際上已經有41條復檢規則推薦,涉及到紅細胞、白細胞、血小板及網織紅細胞方面的具體篩檢內容,各醫院及各品牌血細胞分析儀也多制定了自己相關設備的復檢規則,這是一種非常嚴謹的做法,其目的是減少漏診與差錯的發生,盡量降低假陽性率,避免出現假陰性。


    實際工作中我們經常注意到某些指標、某些項目明顯升高或極度降低,我們會進行復檢。但是在最近工作中,我們發現一例嗜堿細胞并非明顯升高,但經過實際復檢后,其結果卻是非常增高的病例,引起我們重視,值得進行討論。實際上發現嗜堿細胞增高的病例非常少,在教科書上多提到慢性粒細胞白血病、骨髓增值性疾病的骨髓纖維化、過敏反應和惡性腫瘤等會導致嗜堿性粒細胞增高。


    一、材料與方法


    1.病人資料:患者男性,58歲;血液科門診初診:慢性骨髓增值性疾病、骨髓纖維化。


    2.血常規檢驗設備:Siemens Advia 2120和Sysmex XE-5000。


    3.血涂片形態學檢查設備:Cellavision DM96和Nikon光學顯微鏡。


    二、結果


    1.患者標本首先采用Siemens Advia 2120進行血常規檢查,結果見圖1左。


    image.png


    2.在審核報告單時發現嗜堿性粒細胞百分比(Baso%)偏高,但絕對值未超出科室制定的(Baso#)篩檢規則>0.5×10^9/L;同時發現未染色大細胞(Luc%)明顯增高且超出復檢規則制定的標準。于是查看散點圖,見Luc區和Baso區(白色箭頭)均出現較多的散點信號,因此確認必須復檢。為確認異常問題的發現,再用Sysmex XE-5000進行測定。


    3. Sysmex XE-5000測定結果和散點圖見圖1右。檢測結果兩儀器基本接近,但白細胞沒有進行完全分類,在研究參數中發現嗜堿性粒細胞(baso%)為17.7%,幼稚粒細胞(IG%)為19.0%,報警信息包括IG、核左移和NRBC、白細胞分布圖異常等,與嗜堿細胞計數結果無關。查看散點圖則發現較為明顯的是在WBC/BASO散點圖,嗜堿細胞群未能從白細胞總群體中分離開(黃色箭頭),因此在白細胞分類中沒有進行分類,這也可能是有異常細胞出現所導致。另外在DIFF散點圖的藍色粒細胞群下方,單獨出現一個小的細胞群體(小黃色箭頭),這是不常見到的現象,可能是嗜堿性粒細胞、或者其他異常細胞;粒細胞群上方也出現較多的深藍色散點,提示可能有幼稚粒細胞(IG)出現。


    4.由于兩儀器在白細胞分類上給出不同的結果,且都提示異常細胞及嗜堿性粒細胞增多,再根據臨床診斷提示:骨髓纖維化、骨髓增值性疾病,考慮儀器嗜堿性粒細胞分析上會有問題,決定復檢血片,首先用Cellavision DM96對血片進行分析,然后在進行人工顯微鏡復檢。Cellavision DM96掃描結果顯示嗜堿性粒細胞確實增高,人工顯微鏡檢同樣發現嗜堿性粒細胞增加,且均比兩儀器法增高更為明顯。見圖2及圖3。


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    ?圖2 Cellavision DM96分類100個白細胞結果



    image.png

    ?圖3 Cellavision DM96分類300個白細胞結果


    Cellavision首次分類100個白細胞,嗜堿性粒細胞占27.7%,再次分析300個白細胞,嗜堿粒細胞占29.9%。人工顯微鏡鏡檢,嗜堿細胞明顯增加,由于已經Cellavision進行兩次分類,僅將顯微鏡視野下嗜堿細胞圖展示一下,其中每個視野都可見到嗜堿性粒細胞,甚至可達2-4個(圖4)。


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    ?圖4:顯微鏡下嗜堿粒細胞(A:高倍視野;B、C、D:油鏡視野)


    三、討論


    嗜堿性粒細胞是血液白細胞中數量最少的一類細胞,其百分比所占一般為0~1%,絕對值一般不超過0.1×10^9/L;國外有文獻報道參考范圍在0~2%。在日常工作中,嗜堿粒細胞減少或為0的情況常見,而且無臨床意義;嗜堿粒細胞增多則非常少見,假性增多也曾經有過報道,而本病例嗜堿性粒細胞本應增多,但實際檢測結果不高、假性減少則罕見,甚至未有報道。


    1.復檢規則中也有涉及到嗜堿性粒細胞增多的規則,例如國際上制定的41條規則中的第21條寫道:嗜堿性粒細胞絕對計數(Baso#)>0.5×10^9/L;復檢要求:涂片復檢。據了解許多醫院制定的復檢規則中,也基本采用了這個條款,作者所在醫院也是如此。


    2.無論是Siemens還是Sysmex、Mindray等品牌的血細胞分析儀,其檢測嗜堿細胞的原理基本上采用一個相同的方式,即采用特殊的溶血劑將除嗜堿細胞以外的其他成熟白細胞膜溶解或破壞,通過專門的嗜堿細胞計數通道(如BASO或WBC/BASO)通道,使其他白細胞體積縮小或與保持完整的嗜堿性粒細胞產生明顯差異,從而進行分類計數(圖5)。其散點圖的上方是嗜堿粒細胞,下面一大群細胞則是其他四類白細胞。


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    ?圖5:各種原理血細胞分析儀嗜堿細胞計數散點圖和直方圖


    3.嗜堿性粒細胞假性增高多數源于一些血液系統疾病病例儀器分類不準確,還有一些源于異常淋巴細胞增多或中性粒細胞出現中毒顆粒現象。假性減少問題則非常罕見,本病例即為一個非常典型的病例。病人首診時用Siemens Advia2120血細胞分析儀測得Baso結果僅為6.3%,絕對值為0.42×10^9/L;再用Sysmex XE-5000測定,Baso散點圖異常,沒有給出分類結果,研究參數提示Baso值為17.7%。于是啟動復檢規則,首先用Cellavision DM96對血涂片進行分析,兩次結果分別為27.7%和29.9%,均表明嗜堿細胞明顯增高,再進行顯微鏡下觀察,也證明嗜堿性粒細胞增高。兩血細胞分析儀器均未給出正確的嗜堿性粒細胞測定結果。


    4.從血細胞分析儀測定參數和散點圖觀看,并沒有顯著的異常,所造成的假性減低問題其原因尚不完全明了,或許與部分嗜堿粒細胞膜受損、易于破壞有關。我們知道在儀器性能評價中一般并沒有專門的有關復檢嗜

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