血管性認知障礙動物模型神經行為學評價方法-參考記憶篇
血管性認知障礙(vascular cognitive impairment VCI)自1993年首次提出后，已經成為近20 y來社會關注的焦點，也是神經科學領域研究的熱點。VCI的發病率呈逐年上升趨勢，其發病率僅次于Alzheimer病(Alzheimer disease}AD)，是引起老年期癡呆、導致老年生活質量下降的重要因素之一。雖然VCI的臨床研究取得了一定進展，但是VCI的發病機制及病理生理變化仍然不明確，因此迫切的需要更多的基礎研究為VCI的預警診治提供理論依據。
臨床研究與基礎研究最大的區別就是臨床研究可以通過MMSE, Moca等各類量表來直接反應患者的認知狀況，而對動物認知障礙的認定只能通過各類評價工具來完成。但是，文獻報道的認知評價工具及其應用各種各樣，所以我們分析了近年來文獻常用的評價方法及其應用，總結出口前常見的對實驗動物認知功能的評價主要集中在參考記憶、工作記憶等。
1參考記憶評價
空間記憶障礙是目前VCI研究最多也最全面的，空間記憶是指記憶中負責記錄環境信息和空間方位的部分。
1. 1 Morris水迷宮：水迷宮(morris water maze,MWM)是利用動物求生本能促使其在水池內游泳找到逃生平臺，參考記憶的評價通常包含定位航行、空間探索等階段。MWM是目前世界公認的較為客觀的學習記憶功能評價方法，主要是由于動物訓練所需的時間較短，有利于急性期的認知評價;同時在迷宮內的線索，例如氣味可以被消除掉;動物在實驗中不需要禁食;MWM較放射臂迷宮對學習記憶檢測的靈敏度更高，在腦缺血后7d放射臂迷宮沒有陽性發現時就能發現實驗動物的參考記憶受損。由于國內外學者收集參數及排除標準不同，雖然作為經典的學習記憶評價工具近年來其實驗結果的可信度引起國內外學者的質疑。例如:(1)不適合長期記憶功能的評價及重復實驗，采用厭惡逃避測試本身就會產生應激，增加了混雜因素，增加假陽性風險;(2)非認知因素，如活動能力、聽覺、嗅覺、觸覺、焦慮抑郁等可能影響實驗結果的可靠性; （3)實驗結果不能很好的反映組織病理結果; (4) MWM主要是反映海馬依賴的視空間記憶功能，對于嚴重的缺血(全腦缺血模型)損傷皮質、丘腦等結構引起的認知缺陷無法反映。所以，Bingham等在大量實驗的基礎上提出了排除標準以排除混雜因素干擾。
1. 2 Barnes 迷宮 Barnes迷宮(Barnes maze BM)是基于動物運動功能受損時MWM會增加假陽性率的需求而形成的。因為BM對動物的體能消耗較少，理論上BM是利用齲齒動物喜好陰暗環境的特點，通過平臺外的空間定位信息作為線索，有效確定躲避場所的部位。與MWM類似，實驗過程通常包括學習訓練實驗和探索實驗。BM不需要食物剝奪和足底電擊，因此對動物的應激較小;實驗對于動物的體力要求很小，能最低限度的減少因年齡因素所致的體力下降對實驗結果的影響;實驗所需時間較少，根據各種實驗方案的不同整個實驗能在5一10 d內完成。BM在皮質下血管性癡呆引起參考記憶受損/微栓子引起血管性癡呆等模型中廣泛使用。不僅能反映血管性認知障礙時海馬CA1神經元的損傷與再生，而且還與內嗅皮質與齒狀回之間突觸連接數量的降低相關。但是微栓子引起的認知功能障礙出現之前就已經存在焦慮抑郁等神經功能異常，所以BM評價空間學習記憶障礙的可靠性同樣受到情感行為的影響。
1.3放射臂迷宮實驗 放射臂迷宮(radial arm mazeRAM)最早是由Olton及其同事設計的，利用房間內提供的視覺參照信息，可以有效地確定放置食物的臂所在部位，目前最常用的是8臂迷宮。參考記憶錯誤是指動物進入不曾放過食粒的臂。理論上RAM是由食物獎勵驅使的任務。其重復測量的穩定性較好。主要不足是開始實驗前動物需要食物剝奪，動物及食物氣味可能對實驗結果產生干擾。雖然實驗動物的選擇空間有限，但是目前認為RAM仍然是一個測試參考記憶和工作記憶有效且靈敏的工具。RAM已廣泛用于慢性腦缺血(雙側頸總動脈阻斷法、四血管阻斷法,頸總動脈狹窄模型、危險因素引起認知障礙的研究，為了排除視覺受損的干擾，在不同的臂內可以鋪以不同質地的紙張來幫助實驗動物導航。近年來應用的放射臂水迷宮(radial water mazeRAWM)類似于MWM和RAM的結合，結合了MWM和RAM的優點，因此敏感性更高能發現單側頸總動脈阻斷法引起的輕度認知障礙。
1.4主動/被動回避實驗根據所用儀器設備的不同又可分為明/暗箱回避回、穿梭回避、跳臺回避等，回避實驗主要反映皮質功能。所以回避實驗在技術上與暗示關聯條件恐懼相類似。根據動物的逃避方式分為主動回避和被動回避(active/passive avoidance) ，回避實驗簡單易行，觀察指標多。但動物的反應差異性較大，要注意實驗動物的篩選。由于主動回避的假陽性率較被動回避的假陰性率高，所以多采用被動回避實驗。但是被動回避實驗結果與組織病理結果相關性較差。
主動位置回避(ac;tive place avoidanc;e} APA)類似于主動回避，但是可以減少主動回避假陽性率。是指緩慢旋轉的圓形平臺上某一固定的象限設定為電擊區域，平臺在旋轉但是電擊區域不變，實驗動物通過學習避免固定的電擊區域，同樣是利用實驗動物對厭惡刺激(如足電擊)的恐懼和記憶而建立起來的。較傳統主動回避實驗更復雜，因為實驗動物需要忽略轉盤上的嗅覺參照而通過視覺觀察遠處參照物來避免電擊，主要通過電擊次數評價學習記憶功能，運動總距離評價運動功能。Zhou等通過對比發現，在大腦中動脈阻斷的血管性認知障礙模型中APA較被動回避的敏感性更高。