血液培養病原菌的分布及耐藥性

魏軍，賈偉，周嘵燕   第四軍醫大學學報 2005 年 12 月 第 25 卷 第 23 期

   Distribution and antimicrobial resistance of pathogenic bacteria in blood culture 
　　WEI Jun, JIA Wei, ZHOU XiaoYan
　　Lab Center, Affiliated Hospital, Ningxia Medical College, Yinchuan 750004, China
　　【Abstract】 AIM: To investigate the distribution and antimicrobial resistance of pathogens isolated from blood specimens in patients with fever in our hospital from 1995 to 2004. METHODS:  Blood specimens were cultured by Bactec 9120  Fluorescent Instruments. The colonies of the specimens yielding growth were identified by the Vitek32 Instruments and KB method was used for the drug sensitivity tests. RESULTS:  Six hundred and sixtytwo bacteria strains were isolated from a total of 6207 blood culture specimens, with a positive rate of 10.7%. Of the identified bacteria, G+ cocci accounted for 50.3%, G- bacilli accounted for 44.7%, fungi accounted for 3.0%, and anaerobian accounted for 1.1%. The susceptibility rates of G- bacilli to Imipenem, Amikacin and cefoperazone/sulbactam were high. The susceptibility rate of G+ cocci to vancomycin and Imipenem were also high. CONCLUSION:   G+ cocci prevail over G- bacilli in the blood specimens. The staphylococci are the chief bacteria in the childrens blood specimens. Both G+ cocci and G- bacilli are sensitive to Imipenem.
　　【Keywords】 blood culture; pathogens; drug resistance, multiple; isolated identification

　　【摘要】 目的: 調查血液培養中病原菌的菌群分布及耐藥趨勢. 方法: 1995/2004血液培養標本用熒光全自動血液培養儀（Bactec9120）進行培養，陽性標本用全自動微生物鑒定儀（Vitek32）進行鑒定，藥敏采用KB法. 結果: 在6207份血液培養標本中分離出病原菌662株，陽性檢出率為10.7%. 病原菌以革蘭陽性（G+）需氧球菌居首位（50.3%），革蘭陰性（G-）需氧桿菌次之（44.7%），真菌3.0%，厭氧菌1.1%. 血液培養中的G+球菌對萬古霉素和亞胺培南較為敏感，G-桿菌對亞胺培南、舒普深、丁胺卡那較為敏感. 結論: 血液培養病原菌以G+球菌為主，G-桿菌次之；兒童血液培養病原菌以葡萄球菌屬為主；亞胺培南對G+球菌和G-桿菌均具有較高的敏感率.

　　【關鍵詞】 血液培養；病原菌；抗藥性，多藥；分離鑒定

　　0引言
　　血液培養陽性是確診敗血癥的重要依據. 大部分患者血液中的細菌數量很低，特別是在感染早期或抗生素治療后，通常小于1×103 cfu/L，所以提高血液培養陽性率，快速、準確地作出病原學診斷，一直是臨床微生物實驗室的重要課題. 為此我們回顧性分析了我院10年間血液培養結果,并對病原菌分布特點及藥物敏感進行分析.
　　1材料和方法
　　1.1材料
　　1995/2004住院疑似敗血癥靜脈血6207份(13~15 mL),分別注入需氧和厭氧培養瓶中；兒童取靜脈血1~3 mL注入小兒培養瓶內，骨髓取適量注入小兒培養瓶內. 輕搖振蕩混勻，立即轉送入熒光全自動血液培養儀（Bacte 9120）內進行培養. Bacte 9120由美國BD公司出品，并采用該公司配套熒光血液培養瓶，分厭氧、需氧、小兒培養瓶3種. 全自動微生物分析系統(Vitek32)系美國生物梅里埃Vitek公司生產，鑒定卡亦由該公司提供.
　　1.2方法
　　將送檢的血液培養瓶立即放入Bactec9120內培養，待其報警時取出轉種血平板、麥康凱平板、沙保弱平板. 如果厭氧培養瓶報警則取出轉種厭氧培養基，置厭氧環境培養，置35℃溫箱18~24 h后，觀察生長情況. 根據菌落形態，革蘭染色結果，然后上全自動微生物分析系統(Vitek32)進行鑒定. 所用血液培養瓶及鑒定試卡均采取ATCC標準菌株，并進行質量控制. 藥物敏感性試驗采用ＫＢ紙片擴散法,藥敏紙片為北京天壇中國生物制品藥品檢定所和英國Oxoid公司的產品. 結果判定按1997年美國臨床實驗室標準化委員會(ＮＣＣＬＳ)推薦的標準進行. 用標準菌株金黃色葡萄球菌ＡＴＣＣ25923,大腸埃希菌ＡＴＣＣ25922,銅綠假單胞菌ＡＴＣＣ27853定期做藥敏檢測,以確保藥敏結果的可靠性.

　　2結果
　　從6207份血液培養中分離出病原菌622株,陽性檢出率為10.7%,其中革蘭陽性菌（G+） 55.3%,革蘭陰性菌（G-） 44.7%,其中G+需氧球菌50.3%, G-需氧桿菌44.1%,真菌3.0%,厭氧菌1.1%(Tab 1). 主要病原菌的耐藥率見Tab 2.表1662株病原菌的分布（略）表2血液培養分離出的主要病原菌的耐藥率（略）

　　3討論

　　我們研究表明，前10位菌屬分別是葡萄球菌屬、埃希菌屬、鏈球菌屬、沙門菌屬、克雷伯菌屬、腸桿菌屬、腸球菌屬、不動桿菌屬、假單胞菌屬、假絲酵母菌，它們占分離病原菌總數的88.7%. 前10位菌是金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、表皮葡萄球菌、傷寒沙門菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌 、陰溝腸桿菌、中間型葡萄球菌、糞腸球菌、醋酸鈣不動桿菌，占分離病原菌總數的66.9%. 表明腸桿菌科細菌和葡萄球菌屬是引起敗血癥發生的主要病原菌，與國內外資料的報道相似［1］. 根據10 a間病原菌的分布，在疑為敗血癥無條件做血液培養時，首先考慮選用針對這10個菌屬或10種細菌的抗生素的應用以減少盲目性.

　　我們對6種主要的病原菌藥敏進行統計分析，金黃色葡萄球菌β內酰酶(+)為85.7%，MRSA為52.1%，提示金黃色葡萄球菌耐藥性已相當嚴重. 對甲氧西林耐藥（MRS）的葡萄球菌耐藥嚴重，是由于細菌中產生的一種青霉素結合蛋白（PBP）發生突變，產生新的靶位蛋白（PBP2a），導致β內酰酶類抗生素的親和力極度低下而產生耐藥性［2］. 大腸埃希菌耐藥性也相當嚴重. 總之，隨著醫療技術的不斷進步，各種診療手段不斷增加，這有利敗血癥的發生，在這種情況下，對于患有嚴重基礎疾病、長期大量應用免疫抑制劑、免疫功能低下或不全、以及營養不良的患者很容易交叉感染引起敗血癥，快速檢出病原菌，根據抗生素的敏感性，指導臨床合理使用抗生素，對于減輕患者的痛苦及經濟負擔都具有重要的意義［3-5］.　　
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　　作者簡介：魏軍（1961），女(漢族)，甘肅省榆中縣人. 雙碩士學位,主任檢驗師. Tel.(0951)6744340Email.Lydiajunwei@hotmail.com

　　(寧夏醫學院附屬醫院中心實驗室，寧夏 銀川  750004)