(1) 紅細胞原卟啉的熒光光度測定法: ① 正常參考值:不接觸鉛者血EP范圍57-511/μg/L(0.10-0.91/μmol/L),中位數為227μg/L(n=46)。全國范圍的EP正常參考值調查結果為幾何平均數(GM)=280μg/L(0.50μmol/L),P95參考值范圍為<610μg/L(1.09μmol/L)(n=978)。 ② 可接受上限值:用判別分析法求得的職業鉛接觸人群的EP可接受上限值為1.29mg/L(2.30μmol/L)(n=902)。 ③ 診斷下限值:用判別分析法求得的職業性鉛中毒的EP診斷下限值為2.06mg/L(3.67μmol/L)(n=698)。 (2) 石墨爐原子吸收光譜法測定血鉛:為滿足鉛中毒防治工作的需要,需要制訂B-Pb的三種水平(三值),即正常參考值,可接受上限值以及診斷下限值。 ① 正常參考值:由于不同國家和地區的地理環境、生活習慣以及社會與經濟條件不同,各國報道的正常參考值差別較大。如1982年在嚴格的質控條件下進行了全球性B-Pb監測,世界十大城市教師B-Pb值幾何均數,北京為0.31μmol/L(64μg/L),墨西哥城則為1.09μmol/L(225μg/L)。近年國外出版的有關專著中認為非接鉛人群B-Pb正常參考值為100-200μg/L(0.483-0.965μmol/L)。根據1991-1993年全國不同地區非接鉛正常人群1588人的B-Pb檢測所求得的我國B-Pb正常值上限為0.90μmol/L(187μg/L)(表4)。吳榮桂等(1995)報道廣西地區正常人群血鉛正常值為0.403±0.178μmol/L(n=687),男B-Pb(0.473±0.200,n=389)明顯高于女性(0.333±0.157,n=298)(P<0.01),與表4所列南寧地區B-Pb接近,說明一個地區正常人B-Pb在一個時期內相對較穩定。
② B-Pb可接受上限值:B-Pb可接受上限值也稱“生物接觸限值(BEL)”,“生物接觸指數(BEI)”或“生物學耐受量”,是指B-Pb超過正常參考值上限,但一般不會引起鉛中毒的血鉛水平,也就是說,這種B-Pb水平是可以接受的。我國鉛中毒診斷標準修訂協作組采用判別分析法得出的B-Pb可接受上限值為444μg/L(n=902)。美國ACGIH(1991)提出的B-Pb的BEI值為500μg/L(2.41μmol/L),同一時期美國CDC(1992)宜布將兒童B-Pb的可接受上限由原來的250μg/L(1.25μmol/L)降低到100μg/L(0.48μmol/L),原因是有報告稱在100μg/L B-Pb濃度下,兒童失去學習能力。 ③ B-Pb診斷下限值:B-Pb的診斷下限值國外目前尚無統一標準,一般認為B-Pb>3.86μmol/L(800μg/L)時可出現明顯鉛中毒表現。國內目前B-Pb采用2.41μmol/L(500μg/L)作為診斷下限值。近年一項全國性的關于慢性鉛中毒診斷指標的大型調查顯示,用判別分析法得出的B-Pb的診斷下限值為3.07 μmol/L(635μg/L,n=698)。 (3) 紅細胞ZPP快速測定:不接觸鉛的工廠工人血液ZPP濃度為0.774±0.24μmol/L(n=47)。鉛中毒診斷標準修訂協作組(1996)提出的血液ZPP正常參考值上限為1.34μmol/L(6.0μg/g Hb),可接受上限值為1.79μmol/L(8.0μg/gHb),診斷下限值為2.91μmol/L(13μg/g Hb)。
(1) 紅細胞原卟啉的熒光光度測定法: ① 本法檢測限為50μg/L EP,批間精密度變異系數(CV)4.3%-7%。相對回收率96.6%。本法與熒光分光光度法測定結果之相關系數r=0.9796,P<0.001,呈非常顯著相關,說明本法有較高的靈敏度,精密度和準確性,且儀器為國產品,價格適中,適宜于在國內推廣應用。 ② 血樣在0-4℃存放時間不宜過長,應在7天內完成分析。 ③ 正常人紅細胞原卟啉是游離的,故一般稱游離原卟啉(FEP)。鉛中毒或缺鐵性貧血時,紅細胞增加的原卟啉主要以鋅原卟啉(ZPP)形式存在,但用乙酸乙酯和冰醋酸混合液破壞血中紅細胞時,可使ZPP轉變為EP,所以用萃取法測定時稱為EP較妥。 (2) 石墨爐原子吸收光譜法測定血鉛: ① 本法的特點是采用了平臺石墨爐原子化技術,積分吸光度,樣品和鉛標準液用含磷酸二氫胺、Triton-X 100和硝酸的基體改進劑稀釋,以及簡單的連續背景校正,這些都是穩定溫度平臺石墨爐(STPF)技術的基本條件。方法學評價結果:最低檢測限約5μg/L(0.025μmol/L),精密度:批內CV0.4%-5.4%,批間CV 1.0%-4.7%;準確度:低濃度鉛質控物(靶值約為70μg/L)的實測值在靶值±10μg/L范圍內;高濃度鉛質控物(靶值>200μg/L)的實測值在靶值±6%靶值范圍內。本法與具Zeeman背景校正的AAS(4100 2L型)所測B-Pb的相關 性良好(y=1.005X+0.089,r2=0.997,n=44)。 ② 本法灰化程序中,在“熱解”后增加“冷卻”這一步驟是為了減少沿石墨爐熱梯度的影響。這一步驟適用于有縱向加熱石墨爐(longitudinally heated furnance)的AAS(如PE 3110型AAS)。側面加熱石墨爐(side heated furnance)無此熱梯度(如PE 4100 2L型AAS),熱解后可不作冷卻處理。 ③ 用連續背景校正的AAS作B-Pb測定時,有時出現分析結果偏低,或分析信號低于基線,這種情況一般是由于光源未調直引起的干擾。應細心調整儀器,使背景校正器的光束與空心陰極燈的光束恰好重疊。 ④ 方法建立后要用標準物質評價方法的準確度和精密度;樣品測定過程中要用標準物質作質量控制檢查。中國預防醫學科學院環境衛生監測所有國家計量局授權生產的“全血鉛鎘成分分析標準物質(GBW 09132-09134)”供應。 (3) 紅細胞ZPP標準物質 ① 儀器需經常用ZPP標準物質校驗,保證儀器性能良好。 ② 蓋玻片的本底值直接影響ZPP的測定結果,用前需清洗及篩選,棄去本底值過高者。