免疫學方法
在免疫學方法中以純化的被檢物質為抗原,制備相應的抗體,然后用抗原抗體反應對被檢物進行定性和定量測定。常用方法有:
免疫擴散法。將被檢物與相應抗體在一定介質中結合,測定其沉淀環大小,與標準進行比較,計算待測物濃度。此法操作簡單,不需特殊設備,但耗時過長,靈敏度不高,僅適于含量較高凝血因子檢測。
箭電泳。在一定電場中,凝膠支持物內的被檢物與其相應抗體結合形成的一個個“火箭峰”,火箭峰的高度與其含量成正比,通過測定峰高并與標準比較進行定量測定。此法操作復雜,臨床應用較少。
雙向免疫電泳。通過水平與垂直兩個方向進行電泳可將某些分子結構異常的凝血因子進行分離。
酶聯免疫吸附試驗(ELISA法)。用酶標抗原或抗體和被檢物進行抗原結合反應,經過洗滌除去未結合的抗原或抗體及標本中的干擾物質,留下固定在管壁的抗原抗體復合物,然后加入酶的底物和色原性物質,反應產生有色物質,用酶標儀進行測定,顏色深淺與被檢物濃度呈比例關系。該法靈敏度高,特異強,目前已用于許多止血、血栓成分檢測。
免疫比濁法。將被檢物與其相應抗體混合形成復合物,從而產生足夠大的沉淀顆粒,通過透射比濁或散射比濁進行測定。此法操作簡便,準確性好,便于自動化。