蛋白酶K/Proteinase K 層析純,30u/mg 100毫克
蛋白酶 K,威力巨大的廣譜蛋白酶,95C 加熱10 分鐘,則完全失活。數年前首次使用它,是替代 DEPC 處理 RNA 抽提用的離心管和槍頭,效果不錯;后來又用于處理 RNase-Free的水,效果也是一級棒。從此就再也不用 DEPC 了。現在將它的細節公開,與大家分享。 配制 RNA 裂解試劑時,直接用滅菌的雙蒸水配制,*后,加入蛋白酶 K 至終濃度 1ug/ml。輕輕混勻,室溫放置 15 分鐘后即可。槍頭及離心管去除 RNase:先將槍頭及離心管清洗干凈后,移入預先混好的含 1ug/ml 蛋白酶 K 的雙蒸水,徹底浸入。室溫放置 30 分鐘后,連水一起高壓滅菌。棄水后,烘干即可。RNase-Free 水的獲得:直接在滅菌的雙蒸餾水中加入蛋白酶 K 至終濃度 1ug/ml。輕輕混勻,室溫放置 15 分鐘后,滅菌處理即可。該蛋白質的殘留對后續實驗沒有可見的影響。無蛋白質殘留的RNase-Free 水的獲得:這比較麻煩。直接在滅菌的雙蒸餾水中加入蛋白酶 K 至終濃度 1ug/ml。輕輕混勻后,倒入專用的蒸餾器中。放置 15 分鐘后,加熱蒸餾,流出的就是無蛋白質殘留的RNase-Free 水。要提醒的是,該專用蒸餾器頭幾次流出來的水,只能當普通蒸餾水用,因為通道中難確保 RNase-Free 的環境;另外,一定要主要密閉性,否則,流出的水又被污染了。