蛋白濃度過高的時候，會發生聚集而沉淀。有些不易溶蛋白隨著鎳柱的富集作用就會沉淀。由于不知道你實驗目的，簡單認為你要純化表達的蛋白，解決方法：1. 換更強親水肽段載體pet50（從酶切鏈接開始做），但是這樣會在表達出來蛋白中增加非目的蛋白成分2. 不要用最佳濃度咪唑洗脫，用稍差一些的，這樣洗脫出來蛋白速度慢，濃度低，但是看你是否對濃度要求了。3. 重新設計引物把輸水片段刪掉，這樣增加可溶性再表達純化4. 考慮在沉淀里加入稀鹽，促溶。但不知對你實驗是否有影響
