熒光酶免疫分析篩選方法所用試劑

①吸附有抗體的微量孔板  為8行帶有沙門氏菌單克隆抗體的12個孔的試驗板。打開后于2～8℃貯存,可穩定28天。

②微量板托架  足以固定單個孔杯或測試條。

③對照抗原  陽性對照:1瓶(煮沸后凍干的鼠傷寒沙門氏菌懸液)可與沙門氏菌抗體反應;陰性對照:1瓶(煮沸后凍干的奇異變形桿菌懸液)不與沙門氏菌抗體反應。加水復原的對照抗原打開后保存于2～8℃可穩定28天。

④吐溫-20  1瓶25%吐溫-20水溶液。打開后于2～8℃保存,可穩定28天。

⑤磷酸鹽緩沖生理鹽水片劑  用于制備PB-吐溫-20溶液。溶解1片于100mL 蒸餾水或無離子 H₂O 中,配成含0.85%NaCl 0.01mol/L磷酸鹽緩沖液,加8滴吐溫-20。PBS-吐溫溶液用于使陽性或陰性對照抗原復原為水溶液和沖洗步驟。配制后,于2～8℃貯存,可穩定28天。

⑥酶接合劑  1瓶含有與堿性磷酸酶(凍干的)接合的沙門氏菌抗體。打開后加水復原的接合劑于2～8℃貯存,可穩定28天。

⑦接合劑稀釋液  1瓶(10mL/瓶)。含0.5mol/ Tris緩沖液(pH8),0.02%NaN₃,1mmol/ MgCl₂ 和1%牛血清白蛋白。

⑧酶底物片

a.FS檢測——每片含有0.13mg 4-甲基傘形磷酸酮(4-methylumbelliferyl- phosphate.4-MUP)。復制的酶底物必須在2h內使用。

b.ME,VI 和 VR 檢測——每片含有10mg一磷酸酚酞啉(phenolphthalein monophos phate,PMP)。復原的酶底物必須在4h內使用。

⑨酶底物稀釋液  1瓶(31.5mL/瓶)。含有0.02%NaN₃ 防腐劑的10%乙二醇胺水溶液。

⑩終止液  1瓶(5.5mL/瓶)2%Na₃PO₄ 水溶液。

?M肉湯  5.0g 酵母浸膏,2.5g 胰蛋白胨,2.0gD-甘露醇,5.0g 枸橡酸鈉,5.0gNaCl,5.0gK₂HPO₄,0.14gMnCl₂,0.8g FeSO₄,0.75g 吐溫-80,將上述各成分混懸于1LH₂O中,并加熱至煮沸1～2min。分裝于16mm×125mm帶螺旋蓋的試管中,每管10mL。蓋上試管帽(不要旋緊),121℃高壓滅菌15min,旋緊試管帽備用。最終 pH 值應為7.0±0.2。

?診斷試劑  為證實鑒定 EIA 試驗陽性的培養物所用的常規標準方法所需的試劑。