臍帶間充質干細胞的獲取主要有組織塊貼壁法與酶消化法,由于酶對細胞的損傷較大,且細胞得率較低,費用昂貴,因此大多數實驗室采取了組織塊貼壁法進行培養。
取新鮮健康臍帶,用PBS沖洗干凈后,用剪刀鑷子剔去血管,剝出里面的華氏膠組織,將所得組織充分剪碎至1 mm3大小,加入α-MEM培養液置于37℃,5%的CO培養箱培養,培養液中含10% FBS,100U/ml青霉素,100U/ml鏈霉素。臍帶組織培養5-7天后,可見有部分細胞從組織塊周圍爬出,形態呈細小的梭形,一周后,細胞開始迅速增殖,形成大小不等的細胞集落,待細胞長滿后,用0.25%胰蛋白酶消化傳代。