材料與設備
待染色的聚丙烯酰胺凝膠
甘油 (4%;v/v)
干膠器
Whatman 1 號和 Whatman 3 MM 濾紙
溶液
染色液
高甲醇脫色液
標準 (低甲醇) 脫色液
操作程序
1) 凝膠置約 100 ml 染色液中染色。室溫下，在平臺搖床或旋轉平臺上孵育至少 20 min。
2) 棄去染色液（小心，它很容易濺出），用約 100 ml 高甲醇脫色液洗膠板。
3) 于 100~200 ml 高甲醇脫色液中脫色。當脫色液的顏色與膠的顏色一樣深時更換脫色液，約需 2?3 h。脫色液一般要換 3?4 次，通常至大部分藍色褪盡為止。
4) 凝膠置約 100 ml 標準（低甲醇）脫色液中 4?6 h 或過夜，使之完全脫色。至此，膠板的本底應基本清潔。膠板在脫色液中時間過長（數日至數周），會使染上色的蛋白質帶的顔色變淺。脫色后，膠板應保存于室溫、蒸餾水中。
5) 凝膠在甘油（4%;v/v) 水溶液中平衡至少 60 min(乙酸往往會使干膠器和真空泵不能正常運轉，甘油有助于使膠板在千燥時不干裂）。至此，膠板可長時間地保存于 4°C 或用干膠器干燥。
6) 干膠方法如下。先取兩張矩形的玻璃紙（大小比膠板略大)，在水中浸泡數分鐘使之含水。將膠置于兩張玻璃紙之間，確保在膠板與玻璃紙之間無氣泡。然后，按下述順序（自上至下放置于干膠器中：塑料包裝紙（如 Saran 包裝紙、玻璃紙、待干燥的聚丙烯酰胺凝膠、玻璃紙、Whatman 3 MM 濾紙、Whatman 3 MM 濾紙。確保在膠板與干膠器之間無塑料包裝紙。在干膠板器中加熱干燥約 lh。
注：如需照相，最好在膠板干燥之前進行。 展開 | 