照高效液相色譜法（中國藥典2000年版二部附錄VD）測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液（用10%磷酸調節pH值至3.4±0.1）-甲醇（55:45）為流動相；檢測波長為225nm。理論板數按氯唑西林峰計算,應不低于2000,氨芐西林峰與氯唑西林峰的分離度應符合要求。
測定法取裝量差異項下的內容物,精密稱取適量,用流動相溶解并稀釋制成每1ml中含0.5mg的溶液,作為供試品溶液；另精密稱取氨芐西林對照品和氯唑西林對照品適量,用流動相溶解并稀釋制成每1ml中各含0.25mg的溶液,作為對照品溶液,分別量取供試品溶液與對照品溶液各20μl注入液相色譜儀,記錄色譜圖。
按外標法以峰面積分別計算供試品中C16H19N3O4S和C19H18ClN3O5S的含量。