已知B12是幾種變位酶的輔酶，如催化Glu轉變為甲基Asp的甲基天冬氨酸變位酶、催化甲基丙二酰CoA轉變為琥珀酰CoA的的甲基丙二酰CoA變位酶。B12輔酶也參與甲基及其他一碳單位的轉移反應。
B12主要存在于肉類中，植物中的大豆以及一些草藥也含有B12，腸道細菌可以合成，故一般情況下不缺乏，但B12是消化道疾病者容易缺乏的維生素，也是紅血球生成不可缺少的重要元素，如果嚴重缺乏，將導致惡性貧血！
維生素B12廣泛存在于動物食品中。而且其形態無法被人體吸收。此外，維生素B12也是唯一含必須礦物質的維生素，因含鈷而呈紅色，又稱紅色維生素，是少數有色的維生素。維生素B12雖屬B群維生素，卻能貯藏在肝臟，用盡貯藏量后，經過半年以上才會出現缺乏癥狀。人體維生素B12需要量極少，只要飲食正常，就不會缺乏。少數吸收不良的人須特別注意。