• <option id="immmk"></option>
  • <noscript id="immmk"><kbd id="immmk"></kbd></noscript>
    發布時間:2020-05-26 00:08 原文鏈接: 絕對定量滴度測定

    慢病毒活性滴度用什么單位?

    看TU!看TU!看TU!

    TU=transducing units,即每毫升中含有的具有生物活性的病毒顆粒數。其他的VG/mL,VP/mL都是所有病毒顆粒數,死的活的都算上,一片虛假繁榮,請自由玩兒去!

    慢病毒活性滴度怎么標定最準?

    絕對定量!絕對定量!絕對定量!

    又絕對又定量的方法,準到不要不要的!再說了,這“絕對定量”是醫療級病毒產品的公認滴度檢測方法,諾華、Juno,這些CarT大佬們都用!不準?不準的話FDA能認嗎?

    復雜又昂貴的方法,為了準,咱們忍啦!

    1. 標準品檢定繪制標準曲線,精確定量病毒基因組DNA拷貝數

    2.測定插入細胞基因組的5’LTR—3’LTR病毒基因組拷貝數

    3.工具細胞 293T基因組中的病毒特征單拷貝基因A和宿主特征單拷貝基因B

    4.TU=N*C/V=(初始細胞/感染病毒體積)×(2×A基因拷貝/B基因拷貝),計算感染效率

    5.不要反轉錄,不要受RNA降解或反轉錄效率影響

    6.如果病毒有熒光或者抗性,再結合表型聯合判斷

    準!準!準!重復性杠杠滴!

    處女座實驗狗都無法抵抗的滴度標定方法!

    慢病毒滴度標那么準,有用嗎?

    有人問我,為啥我的細胞用慢病毒一感就死?

    為啥我的細胞用慢病毒感染后會出現小黑點?

    很可能是,過感染啦!過感染啦!過感染啦!

    有木有先做預實驗確定細胞的MOI?有沒有根據病毒滴度準確計算病毒用量?

    越是高濃度高純度的病毒,越是需要精確計算滴度,以避免感染不足或者過量感染,保證最好的細胞狀態,以繼續下游實驗,這樣才能省時省力省病毒啊!


  • <option id="immmk"></option>
  • <noscript id="immmk"><kbd id="immmk"></kbd></noscript>
    伊人久久大香线蕉综合影院首页