“12345，上山打老虎”這是毛博小時候經常唱的一首童謠，也教會了我怎么數數字。這項技能很重要，多年以后毛博遠渡重洋，在米國實驗室打工的時候還要經常用到這項技能，那就是細胞計數吧。其實，細胞計數最關鍵的不是計數，而是計數活細胞。因為在那一大堆細胞里面，肯定有死有活的，只有活的才對我們的實驗有意義，是吧？所以，細胞計數最關鍵的就是首先要鑒別細胞的死活。
細胞計數的實驗用品非常非常簡單，都是任何一家實驗室常備的：0.4%臺盼藍溶液、95%乙醇溶液、普通顯微鏡、試管、吸管、細胞計數板、綢布。這里的臺盼藍就是用來鑒別細胞死活的。臺盼藍又稱為活體染料，不能透過活細胞正常完整的細胞膜，故活細胞不會染上任何顏色。而死亡細胞的細胞膜通透性增高，可使染料進入細胞內而使細胞染上藍色。
細胞計數的具體步驟如下：
1.計數板處理
用95%乙醇溶液把計數板使勁地擦擦擦后，再用綢布擦干凈，再拿一張蓋玻片，也用綢布擦干凈。最后把蓋玻片覆蓋在計數板上面。
2.制備細胞懸液
將細胞用生理鹽水制備成適當濃度的細胞懸液。再向計數板滴一滴。向計數板中滴細胞懸液時要干凈利落，量要適當，過多易使蓋片漂移，或淹過蓋片，過少則容易出現氣泡。這樣多算失敗。重頭再來吧。
3.染色
按與細胞懸液1∶1的比例，用滴管吸取0.4%臺盼藍染液，從計數板邊緣緩緩滴入，使之充滿計數板和蓋片之間的空隙中。不要使臺盼藍染液流到旁邊的凹槽中或帶有氣泡，否則也算失敗哈！要重做滴。稍候片刻，將計數板放在低倍鏡下（10倍即可）觀察計數。
4.計數方法
計算計數板的四角大方格內的細胞數。如下圖所示，只計數A、B、C、D這四個大格子里面的細胞哈。計數時，只計數活細胞。鏡下觀察，凡是亮晶晶的不著色的透明的為活細胞，凡是染上藍色者為死細胞。若聚成一團的細胞，則只算一個細胞哈。在一個大方格中，如果有細胞位于線上，按照“計下不計上；計左不計右”的原則，即“計下線細胞不計上線細胞，計左線細胞不計右線細胞”。如果不放心的話，可以重復計數2-3次，算一個平均值即可。
5.計數的換算
計完數后，需換算出每ml細胞懸液中的細胞數。 每一大方格內細胞數×10，000＝細胞數/ml，故可按下式計算：細胞懸液的濃度=細胞數/ml＝4個大格細胞總數/4×10，000。如計數前已稀釋，可再乘稀釋倍數。
好了，計數完畢，打完收工。大家也可以看到，細胞計數不是什么高大上的技術。但是，還是一個非常常用的技術。因為任何涉及到細胞計數的實驗，首先就是要確定細胞的濃度和數量。現在有細胞計數儀。可以代替人工細胞計數。不過說句實話，一般不是土豪實驗室的話，都沒有配備。毛博當年在米國做博士猴的時候，也是用以上的方法人工計數的。人工計數的準確性一點不比細胞計數儀差，而且時間短，費用低，就算是窮人實驗室的小米加步槍，效果也不一定比土豪實驗室的飛機大炮差。