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    發布時間:2019-04-27 16:31 原文鏈接: 細胞周期的DNA檢測

    Ⅰ、樣品準備 準備以下一種或幾種樣品

    A、組織單細胞懸浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盤細胞)

    B、組織培養細胞

    C、Ficoll-hypaque分離的單核細胞

    Ⅱ、反應體系-DNA低滲緩沖液

    檸檬酸三鈉     0.25g

    Triton-X 100 0.75ml

    Propidium iodide 0.025g

    核糖核酸酶      0.005g

    蒸餾水        250ml

    我們將該DNA低滲溶液于密閉瓶子中存放數月后并無發現有任何染色活性的丟失

    Ⅲ、染色

    1、 每一個管子中放入1×106個細胞;

    2、 樣品離心后盡可能完全地移去上清液,并且不要打碎沉淀塊;

    3、 入1ml的DNA低滲染色緩沖液至沉淀中,并混勻;

    4、 樣品于4℃下避光30分鐘或最長不超過1個小時以備流式細胞儀分析。

    注意:延長在低滲緩沖液的曝光時間會引起樣品碎片的增加。

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