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    發布時間:2020-09-07 12:46 原文鏈接: 紅細胞滲透脆性(孵育)實驗

    實驗原理
      紅細胞在低滲鹽溶液中,當水滲透其內部達一定程度時,紅細胞發生膨脹、破裂。觀察紅細胞在不同濃度鹽溶液中的溶血程度,可以判斷其對低滲鹽溶液的抵抗力,這種抵抗能力與紅細胞表面積與容積的比值有關,比值小者,紅細胞抵抗力較小,脆性增加。反之抵抗力增大。
    實驗方法
      材料:
      1.171.1mmol/LNaCl溶液、蒸餾水
      2.移液管、試管、水浴箱等
      方法:
      1.取12支試管,分別按下表加入NaCl溶液和蒸餾水,得不同濃度的NaCl溶液。

    試管號

    1

    2

    3

    4

    5

    6

    7

    8

    9

    10

    11

    12

    171.1 M NaCl溶液(ml)

    0.30

    0.35

    0.40

    0.45

    0.50

    0.55

    0.60

    0.65

    0.70

    0.75

    0.80

    0.85

    蒸餾水(ml)

    0.95

    0.90

    0.85

    0.80

    0.75

    0.70

    0.65

    0.60

    0.55

    0.50

    0.45

    0.40

    NaCl最終濃度(mmol/L)

    41.0

     

    47.9

     

    54.7

     

    61.6

     

    68.4

     

    75.2

     

    82.1

     

    88.9

     

    95.8

     

    102.6

     

    109.4

     

    116.3

     

     

    (g/L)

    2.4

    2.8

    3.2

    3.6

    4.0

    4.4

    4.8

    5.2

    5.6

    6.0

    6.4

    6.8

      2.每管中加入1滴全血(或者肝素抗凝血),輕輕搖勻,在室溫靜置2h后觀察結果。

      3.孵育脆性實驗,先將肝素抗凝全血37℃孵育24h后,再做1.2步檢測。


    實驗結果計算

      先從高濃度開始觀察,上層溶液出現透明紅色者為開始溶血管,管底紅細胞完全消失者為完全溶血管。

      參考范圍:

      開始溶血75.2mmol/L-82.1mmol/L(4.4-4.8g/L)NaCl溶液

      完全溶血47.5mmol/L-54.7mmol/L(2.8-3.2g/L)NaCl溶液

      孵育后

      開始溶血82.1mmol/L-88.9mmol/L(4.8-5.2g/L)NaCl溶液

      完全溶血54.7mmol/L-61.6mmol/L(3.2-3.6g/L)NaCl溶液

    注意事項

      1.氯化鈉必須干燥后準確稱量,用前新配。

      2.每次試驗應做正常對照,其結果應在正常范圍內,被檢者與正常對照開始溶血管NaCl溶液濃度相差0.4g/L有診斷價值。

      3.所有器具要干燥,血標本應直接滴入液體內,混勻時不能用力過大,以避免體外溶血。

      4.在白色背景下觀察結果,判斷完全溶血試管時,可低速離心1min后觀察。

      5.重度貧血患者紅細胞太少,黃疸患者開始溶血管不易觀察,均可取肝素抗凝血以生理鹽水洗滌后,再用生理鹽水配成50%的紅細胞懸液進行檢測。

      6.血液標本應避免用枸櫞酸鹽、草酸鹽和EDTA鹽抗凝血,以防增加離子強度。如用以上抗凝血標本應用洗滌紅細胞進行檢測。


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