紫外—可見分光光度法是利用某些物質分子能夠吸收200 ~ 800 nm光譜區的輻射來進行分析測定的方法。這種分子吸收光譜源于價電子或分子軌道上電子的電子能級間躍遷，廣泛用于無機和有機物質的定量測定，輔助定性分析（如配合IR）。
在分子中，除了電子相對于原子核的運動外，還有核間相對位移引起的振動和轉動。這三種運動能量都是量子化的，并對應有一定能級。
分子總能量：E分子 = E電子 + E振動 + E轉動
當用頻率為n的電磁波照射分子，而該分子的較高能級與較低能級之差△E恰好等于該電磁波的能量 hn時，即有：
△ E = hn （ h為普朗克常數）
此時，在微觀上出現分子由較低能級躍遷到較高的能級；在宏觀上則透射光的強度變小。
用一連續-輻射的電磁波照射分子，將照射前后光強度的變化轉變為電信號，并記錄下來，然后以波長為橫坐標，以電信號（吸光度 A）為縱坐標，就可以得到一張光強度變化對波長的關系曲線圖-紫外吸收光譜圖
按Lambert-Beer定律可進行定量測定。測量時盛溶液的吸收池厚度為b，若濃度c已知，測得吸光度A即可計算出ε值，后者為化合物的物理常數。若已知ε值，則由測得的吸光度可計算溶液的濃度。
由上訴可見，當測定一個化合物的吸收光譜時，被吸收光的波長和摩爾吸光系數的兩個重要的參數，前者表示吸收能量的大小，后者反映能級躍遷的幾率，屬于化合物的特性。
由上訴可見，當測定一個化合物的吸收光譜時，被吸收光的波長和摩爾吸光系數的兩個重要的參數，前者表示吸收能量的大小，后者反映能級躍遷的幾率，屬于化合物的特性。