通常，肉毒桿菌在有氧環境中、低于4°C或pH<4.5條件下不生長。只有在厭氧、低鹽、偏酸的特殊條件下，才可生長繁殖并產生肉毒毒素。其中，具有蛋白分解功能的肉毒桿菌最適產毒培養溫度為37°C，不具有蛋白分解功能的菌株最適產毒培養溫度為30°C，甚至在3~4℃的低溫條件下也可產生肉毒毒素。
芽胞特性
肉毒桿菌芽孢在自然界生命力極強，在干燥環境中可存活30年以上，沸水中可存活3~4h。對紫外線、乙醇和酚類化合物不敏感，甚至對輻射照射也有一定抵抗力。在180攝氏度下干熱5~15min，100攝氏度下濕熱5h，或高壓蒸汽121攝氏度、30min，才能殺死肉毒桿菌芽孢。此外，芽孢對加氯水、次氯酸鹽也非常敏感。