取肝素抗凝血1ml加Hanks 液1：1 稀釋后，沿管壁徐徐滴流疊加盛有2ml淋巴細胞分離液的試管內（注意勿與分離液混合，然后2000r/min 水平離心20min，管內分為4 層，自上而下依次為血漿，單個核細胞，顆粒白細胞、紅細胞（圖2—1）。用毛細管伸至單個核細胞層中（位于細胞分離液與血漿的界面上），沿管壁輕輕吸出全部細胞。然后用Hanks 液洗兩次，每次2000r/min 離心10min，最后用RPMI l640 培養液將細胞配成2×106/m1 的細胞懸液備用。
