登革熱IgMELISA試劑盒說明書(捕獲法)（三）

質量控制

每一試劑中均含有陰性和陽性質控血清，這些質控可接受的免疫指數（ISR）值會在以下的詳細表格中說明，陰性質控和陽性質控是用于監測試劑的實質性錯誤，陽性質控并不保證試劑臨界值的精確性。如果任一質控的ISR值不符合說明書，則本次實驗是無效的必須重做，如果實驗是無效的，病人的結果不能公布。質量控制的執行必須與地方的，國家的或聯盟規則要求和你實驗的質量控制程序標準相一致，建議使用者參照NCCLS C24A和42CFR493、1256作為質量控制實踐的指引。以下的結果僅作為例子。

陰性質控的計算：計算DENRA和NCA的登革熱病毒陰性質控值。

例如：登革熱陰性質控

                     DENRA          NCA

          No 1             0.108          0.066 

          No 2             0.082          0.061 

          總和             0.190          0.127

平均值（DENRA）= 0.190÷2 = 0.095

       （NCA） = 0.127 ÷ 2 = 0.064 

計算DENRA/NCA的比例： 0.095÷0.064 = 1.48

登革熱陰性質控的計算DENRA/NCA比例高于1.65，則實驗必須重做。

陽性質控的計算：計算NCA和DENRA的登革熱IgM陽性質控。

例如：登革熱陽性質控

DENVRA              NCA

         No 1            0.635             0.105

         No 2            0.655             0.115

         總和            1.290             0.220

平均值（DENVRA）= 1.290÷2 = 0.645

       （NCA） = 0.220 ÷ 2 = 0.110 

計算DENVRA/NCA的比例： 0.645÷0.110 = 5.86

登革熱陰性質控的計算DENVRA/NCA比例低于5.0，則實驗必須重做。

為了能出具實驗報告，實驗結果必須滿足下列表格的要求。如果實驗結果不能完全滿足下列要求，則說明試劑退化了或者實驗步驟出現了問題，實驗必須重做。

表1：

結果計算:

ISR值的計算：如果樣品是做雙份檢測，計算DENRA兩個陰性質控的平均OD值，計算NCA兩個陰性質控的平均OD值，并計算DENVRA/NCA的比率(ISR)。如果未知樣品只做了一份，直接用DENVRA OD值除以NCA OD值

選擇臨界值和確定可疑范圍：109個真陽性和97個真陰性樣品用于優化ISR臨界值，建立可疑范圍。可疑范圍由兩個臨界值決定，ISR≥2.84的為陽性，相應的特異性為99%，靈敏度為91%；ISR≤1.65的為陰性，相應的特異性為96%，靈敏度為94%，可疑范圍為1.65-2.84.

結果說明

表2：:

期望值

疫區人群

此登革熱IgM檢測試劑盒在2009年被南美的一間診所用于檢測有登革熱癥狀人群的血清樣本.被篩查的66位個體在起初都有發燒的癥狀.樣本中包含有初次和二次的感染.樣本的反應關系見下面表3和表4.

表3：疫區人群患者的期望值

a:所有反應的樣品都經PRNT驗證

非疫區人群

2004年3月期間,從佛羅里達州, 德克薩斯州, 賓夕法尼亞州收集無登革熱癥狀的200份血清樣本.樣本覆蓋男女的不同年齡階段.被篩選的血清反應性見下表4

表4：非疫區無登革熱癥狀人體的期望值

               a:此樣品經PRNT驗證為登革熱陽性