液相色譜柱常見故障及排除

柱壓升高，色譜柱入U濾片被流動相或樣品中顆粒堵住。

樣品組分在濾片上沉淀堵住濾片。 卸下入口接頭的濾片，使用1：1的硝酸溶液超聲清洗5min，再用水、

甲醇清洗除去水份。

樣品及流動相使用0．45μm濾膜除去微量雜質。

使用流動相作溶劑配制樣品。  

新柱柱效低 柱外死體積大。

樣品在流動相中溶解不好，影響傳質過程。 更換連接管，重新連接色譜柱，降低死體積。

使用合適的流動相或使用流動相溶解樣品。  

舊色譜柱柱效低，分離不好，柱入口床層塌陷。 填料被流動相溶蝕而流失。 用同型填料填補柱效可部分恢復。

對硅膠質填料，流動相PH值在2—7范圍內，否則可能被溶蝕。  

舊色譜柱柱效低分離不好，有時出現雙峰。 入門填料被污染變質所致。 用強溶劑沖洗。

刮除被污染的床層，用同型的填料填補柱效可部分恢復。

污染嚴重，則廢棄或重新填裝。  

新柱接到儀器上后，柱頭漏液。 柱接頭與儀器之間連接管的壓環變形量不夠。 用扳手順時針方向擰緊1／4圈直到不漏液為止。  

新柱接到儀器上后，啟動儀器沒有柱壓降。 柱放置時間過長柱內充裝的液體己揮發干。 繼續開泵，用流動相將柱內氣體置換掉。  

新柱接到儀器上后，檢測器出口不斷有小氣泡出

現。

①同上。

② 流動相脫氣不徹底特別是MeOH／H20體系由于氫鍵作用很容易出現氣泡。 ①同上。

②配好流動相后一定要進行脫氣處理。  

新柱接到儀器上后柱壓降不斷增加，甚至超過儀器的耐壓限。 柱入口濾片被固體顆粒堵塞或被毒

菌堵塞。 更換或清洗柱入口濾片；用0．45μm過濾膜過濾流動相除去微小顆粒物。  

進樣次數增加柱壓降逐漸增加。 ①樣品中含有不溶于流動相的微小顆粒物。

②樣品在流動相中析出微小結晶。 ①用0．45μm過濾膜過濾樣品。

②推薦使用流動相溶解樣品。  

使用—段時間后，柱效下降，分離不好。 ①柱填料被流動相溶解而流失。

②柱填料被樣品雜質污染。 ①推薦使用予柱。如柱床層塌陷，用相同型號填料填補。

②推薦使用保護柱或用強溶劑沖洗色譜柱除去污染雜質。  

柱使用一段時間后，柱效下降出現雙峰。 柱入口床層被污染使柱填料變質。 用強溶劑沖洗除去雜質。  

柱使用—段時間后，柱效下降，出現峰拖尾。 柱入口床層被污染。 用強溶劑沖洗20-30ml，若效果不明顯應廢棄。  

進樣量增大與峰面積增加不成正比．即進樣量與峰面積不是線性關系。 樣品在流動相中的溶解度小，只有部分樣品被流動相沖如色譜柱中而另一部分則沉積在柱人口端。 ①用流動相溶解樣品。

②樣品的濃度不宜太大。

④進樣量不宜過大。  

使用緩沖液作流動相時，柱壓降升高很快。 霉菌生長所致。 ①在流動相中加入有毒物質或加疊氯化鈉防止霉菌生長。

②實驗結束后先用純水后用MeOH各沖洗20-30ml后關機。  

用5μm顆粒填料柱時， 以MeOH／H20作流動相柱壓較高。 MeOH與水之間由于氫鍵作用黏度增大。 可用乙腈／水體系使柱壓降低，分離效率更好。  

長時間放置的色譜柱，出現雙峰。 柱床層出現干裂。 柱放置時，最好使用相應的溶劑充填好，防止受大的機械震動，如床層干裂應廢棄掉。  

流動相洗滌強度由弱漸強時出現很多雜質峰。 強溶劑將弱溶劑洗不出的雜質沖出來。 不影響柱的性能。  

柱使用一段時間后保留值逐漸縮短。 柱中固定相流失所致。 ①更換色譜柱。

②檢查所用的色譜條件是否合適。  

在U V色譜圖中，靠近死時間處出現負峰。 ①進樣時壓力波動所致。

②樣品溶劑比流動相的UV吸收值低。 ①采用閥進樣。

②用流動相溶解樣品。