液相色譜日常維護及故障排除

　　一）壓力異常

　　 操作壓力的變化往往是故障的征兆。

　　A、沒有壓力顯示，沒有流動相流動：

　　 原 因 解決方法

　　1、電源問題 接通電源，開機

　　2、保險絲被燒壞 更換保險絲

　　3、控制器設定不正確或設定失敗 采取恰當的設定、、修理或更換控制器

　　4、柱塞桿折斷 更換柱塞桿

　　5、泵頭內有空氣 溶劑脫氣、啟動泵抽出空氣

　　6、流動相不足 補充流動相、更換入口濾頭

　　7、單向閥損壞 更換單向閥

　　8、漏液 擰緊或更換手緊接頭

　　B、流動相流動正常，但沒有壓力顯示：

　　 原 因 解決方法

　　1、儀表損壞 更換儀表

　　2、壓力傳感器損壞 更換壓力傳感器

　　C、壓力持續偏高

　　 原 因 解決方法

　　1、流速設定過高 調整流速設定

　　2、柱前篩板堵塞 反沖色譜柱、更換篩板、更換色譜柱

　　3、流動相使用不當或緩沖鹽的結晶沉淀 使用恰當的流動相、沖洗柱塞桿。

　　4、色譜柱選擇不當 選擇恰當的色譜柱

　　5、進樣閥損壞 清洗或更換進樣閥

　　6、柱溫過低 提高溫度

　　7、控制器失常 修理或更換控制器

　　8、保護柱阻塞 清洗或更換保護柱

　　9、在線過濾器阻塞 清洗或更換在線過濾器

　　D、 壓力持續偏低：

　　 原 因 解決方法

　　1、流速設定過低 調整流速

　　2、系統漏液 確定漏液位置并維修

　　3、色譜柱選擇不當 選擇恰當的色譜柱

　　4、柱溫過高 降低溫度

　　5、控制器失常 維修或更換控制器

　　E、 壓力波動：

　　 原 因 解決方法

　　1、泵中有氣體 溶劑脫氣、從泵中除去氣體

　　2、單向閥損壞 更換單向閥

　　3、泵密封損壞 更換泵密封

　　4、脫氣不充分 重新過濾一遍、溶劑脫氣

　　5、系統漏液 確定漏液位置并維修

　　6、使用梯度洗脫 由于流動相粘度的變化引起的壓力波動

　　二） 漏 液

　　 通常可以通過擰緊或更換管路接頭來解決漏液的問題。但值得注意的是過份擰緊會導致金屬接頭的漏液和塑料接頭的磨損。如果通過稍微擰緊接頭不能解決漏液的問題，就必須將接頭取下，檢查是否損壞（例如，卡套損壞、密封表面有雜質）；損壞的接頭應該更換掉。

　　A）接頭處漏液

　　原 因 解決方法

　　1、接頭松動 擰緊

　　2、接頭磨損 更換

　　3、接頭過緊 擰松，再重新擰緊、更換

　　4、接頭被污染 拆下清洗、更換

　　5、部件不匹配 使用同一品牌的配件

　　B）泵漏液

　　原 因 解決方法

　　1、單向閥松動 擰緊單向閥（不必擰的過緊）、更換單向閥。

　　2、接頭松動 擰緊接頭（不必擰的過緊）

　　3、混合器密封損壞 更換混合器密封、更換混合器。

　　4、泵密封損壞 維修或更換泵密封件

　　5、壓力傳感器損壞 維修或更換壓力傳感器

　　6、脈沖阻尼器損壞 更換脈沖阻尼器

　　7、比例閥損壞 檢查隔膜，如果漏液立即更換、檢查手緊接頭，損壞的立即更換

　　8、放空閥的損壞 擰緊放空閥、更換放空閥

　　C）進樣閥漏液

　　原 因 解決方法

　　1、轉子密封損壞 重新安裝或更換進樣閥

　　2、定量環阻塞 更換定量環

　　3、進樣口密封松動 調整

　　4、進樣針頭尺寸不合適 使用恰當的進樣針

　　5、廢液管中產生虹吸 保持廢液管高于廢液液面

　　6、廢液管阻塞 更換或疏通廢液管

　　D）色譜柱漏液

　　原 因 解決方法

　　1、尾端接頭松動 擰緊接頭

　　2、卡套內有填料 拆下、清洗卡套、重新安裝

　　3、篩板厚度不合適 使用合適的篩板

　　E）檢測器漏液

　　原 因 解決方法

　　1、流通池墊片損壞 更換墊片、避免過大的背景壓力（壓力降）

　　2、流通池窗破碎 更換窗口

　　3、手緊接頭漏液 擰緊或更換

　　4、廢液管阻塞 更換廢液管

　　5、流通池阻塞 重新安裝或更換

　　三）譜圖問題

　　 液相色譜系統的許多問題都能在譜圖上反映出來。其中有一些問題可以通過改變設備參數得到解決；對于色譜柱和流動相的正確選擇是得到好的色譜圖的關鍵。

　　A）峰拖尾

　　原 因 解決方法

　　1、篩板阻塞 反沖色譜柱、更換進口篩板、更換色譜柱

　　2、色譜柱塌陷 填充填料至色譜柱中

　　3、干擾峰 改變流動相或更換色譜柱

　　4、流動相PH選擇錯誤 調整PH值，一般在3-7

　　5、樣品與填料表面的溶化點發生反應 加入離子對或堿性修飾劑、更改色譜柱

　　6、柱外效應 調整系統連接（使用更短、內徑更小的管路）使用小體積的流通池

　　7、二級保留效應，反相模式 加入三乙胺（堿性樣品）、加入乙酸（或酸性樣品）、加入鹽緩沖劑（離子化樣品）換柱

　　8、緩沖液不合適 使用濃度20-100mM的緩沖液、使用Pka等于流動相PH值的緩沖液

　　B）峰前延

　　原 因 解決方法

　　1、柱溫低 升高柱溫，一般為25-40度，不得超過60度

　　2、樣品溶劑選擇不恰當 使用流動相作為樣品溶劑

　　3、樣品過載 降低樣品含量

　　4、色譜柱損壞 更換新柱

　　C）峰分叉

　　原 因 解決方法

　　1、分析柱污染 可能是柱子污染，再生；入口可能被阻塞，拆下來清洗必要時更換色譜柱。

　　2、樣品溶劑不溶于流動相 采取流動相作為樣品溶劑。

　　D）峰變形

　　原 因 解決方法

　　1、樣品過載 減少樣品載量

　　2、樣品溶劑選擇不恰當 減少進樣體積、運用低極性樣品溶劑

　　E）額外的峰

　　原 因 解決方法

　　1、樣品中有其他組份 正常

　　2、前一次進樣的洗脫峰 增加運行時間或梯度斜率、提高流速

　　3、空位或鬼峰 檢查流動相是否純凈、使用流動相作為樣品溶劑、減少進樣體積

　　F）保留時間波動

　　原 因 解決方法

　　1、溫控不當 調好柱溫

　　2、流動相組分變化 防止變化（蒸發、反應等）

　　3、色譜柱沒有平衡 在運行前給予足夠的時間平衡色譜柱

　　4、流速變化 重新設定流速

　　5、泵中有氣泡 從泵中除去氣泡

　　3、流動相選擇不恰當 更換合適的流動相、選擇合適的混合流動相

　　G）基線漂移

　　原 因 解決方法

　　1、柱溫波動。 控制好柱子和流動相的溫度

　　2、流動相不均勻或純度不高 使用HPLC級的溶劑、高純度的鹽及添加劑、重蒸水、流動相在使用前進行脫氣

　　3、流通池被污染或有氣體 用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池

　　4、檢測器出口阻塞 取出阻塞物或更換管子

　　5、流動相配比不當或流速變化 更改配比或流速

　　6、柱平衡慢，特別是流動相發生變化時 更改流動相時，平衡半小時

　　7、流動相污染、變質 檢查流動相的組成、重新配制

　　8、樣品中有強保留的物質以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現出一個逐步升高的基線。 重新用水及甲醇清洗柱，除去強留份。

　　10、檢測器沒有設定在最大吸收波長處。 將波長調整至最大吸收波長處

　　H）基線噪音

　　原 因 解決方法

　　1、在流動相、檢測器或泵中有空氣 流動相脫氣。強極性溶劑沖洗系統除去氣。

　　2、漏液 檢查管路接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。

　　3、流動相混合不完全 用手搖動使混合均勻或使用低粘度的溶劑

　　4、溫度影響（柱溫過高） 減少差異、穩定時間長一點

　　5、在同一條線上有其他電子設備 檢查干擾是否來自于外部，加以更正。

　　6、泵振動 在系統中加入脈沖阻尼器

　　7、流動相污染、變質或由低質溶劑配成 檢查流動相的組成。

　　8、流動相各溶劑不相溶 選擇互溶的流動相

　　9、檢測器/記錄儀電子元件的問題 斷開檢測器和記錄儀的電源，檢查并更正。

　　10、流通池污染 清洗流通池

　　11、檢測器燈能量不足 更換燈

　　12、色譜柱填料流失或阻塞 更換色譜柱

　　13、流動相混合不均勻或混合器工作不正常 維修或更換混合器

　　I）寬峰

　　原 因 解決方法

　　1、流動相組成變化 重新制備新的流動相

　　2、流動相流速太低 調節流速

　　3、漏液（特別是在柱子和檢測器之間） 檢查接頭是否松動、泵是否漏液、是否有鹽析出以及不正常的噪音。如果必要更換密封。

　　4、檢測器設定不正確 調整設定

　　5、柱外效應影響：柱子過載；檢測器對反應時間或池體積響應過大；柱與檢測器間管路太長或管路內徑太大 小體積進樣、減少響應時間或使用更小的流通池、使用內徑為0.007-0.01的短管路、減少響應時間

　　6、緩沖液濃度太低 增加濃度

　　7、色譜柱污染或失效，塔板數較低 更換同樣類型的色譜柱。如果新柱子可以提供對稱的色譜峰，則用強溶劑沖洗舊柱子。

　　8、柱入口塌陷 打開柱入口，填補塌陷或更換柱子

　　9、呈現兩個或多個未被完全分離的物質的峰 選擇其它類型的色譜柱以改善分離效果

　　10、柱溫過低 提高柱溫。溫度不宜超過60℃

　　12、檢測器時間常數太大 使用較小的時間常數

　　J）所有的峰面積都太小

　　原 因 解決方法

　　1、檢測器衰減設定過高或過低 減少或增加衰減的設定

　　2、檢測器時間常數設定太大 設定較小的時間常數

　　3、進樣量太少或太多 增大或減少進樣量

　　4、記錄儀連接不當 使用正確的連接

　　四）進樣閥的問題

　　以下問題在使用進樣閥過程中有可能發生。

　　A）手動進樣閥，轉動不靈

　　原 因 解決方法

　　1、轉子密封損壞 更換或調整轉子密封

　　2、轉子太緊 調整轉子的松緊度

　　B）手動進樣閥，載樣困難

　　原 因 解決方法

　　1、進樣閥安裝不當 重新安裝

　　2、定量環阻塞 清洗或更換定量環

　　3、進樣器污染 清洗或更換進樣器

　　4、管路阻塞 清洗或更換管路