液液分配色譜儀是利用混合物各組分在固定相和流動相中分配系數的不同進行分離的。
一、固定相：
固定相由載體和固定液組成。
1、載體：
載體只起負載固定液的作用。
（1）要求：惰性，無吸附能力，純凈，顆粒均勻。
（2）種類：
1）硅膠：重現性差。
2）硅藻土：應用最多。
3）纖維素：紙色譜。
2、固定液：
理論上液液分配色譜可供選擇的固定液品種很多，但許多固定液能被溶劑溶解，只有不被流動相溶解或溶解度很小的固定液才有實用價值，因此只有少數固定液能用于液液分配色譜，如強極性的β，β′－氧二丙睛、中等極性的聚乙二醇（PEG）、非極性的十八烷（ODS）和非極性的角鯊烷等。
二、流動相：
要求流動相對固定液的溶解度盡可能小，因此流動相和固定液的性質往往處于兩個極端。
三、固定液和流動相的選擇：
1、正相分配色譜：
固定液的極性大于流動相的極性。
（1）固定液：水、緩沖溶液、稀硫酸、甲醇和丙二醇等。
（2）流動相：石油醚等。
（3）洗脫順序：極性大的組分保留作用強，極性小的組分保留作用弱。
2、反相分配色譜：
固定液的極性小于流動相的極性。
（1）固定液：硅油和液體石蠟等極性較小的有機溶劑。
（2）流動相：水、各種水溶液（酸、堿、鹽及緩沖液）、與水混合的有機溶劑。
（3）洗脫順序：極性小的組分保留作用強，極性大的組分保留作用弱。
四、應用：
由于固定液易流失，重復性差，已被化學鍵合相色譜代替。但正相分配色譜在薄層色譜中還廣泛使用。