測定奶粉中雙氰胺

目前中國市場上進口的新西蘭大包奶(包括脫脂奶粉、全脂奶粉)占到了中國總進口量的80%，而新西蘭乳制品占到了中國全進口嬰幼兒食品的40%左右。近日，媒體爆出新西蘭出產的部分牛奶和奶粉中檢測出少量雙氰胺化學殘留物，引起了很多人的關注。雙氰胺化學名稱為二氰二氨、二聚氰胺，白色結晶粉末。

本文建立了嬰幼兒奶粉中雙氰胺高效液相色譜分析方法，樣品前處理過程簡單、快速，方法定性定量準確，靈敏度高，完全滿足檢測要求。

1 實驗部分

1.1主要儀器和試劑

LC 5500高效液相色譜儀：配有紫外檢測器

DM-100在線脫氣機

超聲波水浴

離心機

乙腈

乙酸銨溶液(0.01mol/L)

乙酸

雙氰胺凈化管

雙氰胺標準品(含量≥99.0%)

1.2色譜條件

色譜柱：Venusil HILIC，250 mm×4.6mm ，5μm。

流動相：乙腈+乙酸銨溶液(0.01mol/L，PH=4.20)=90+10，0.45 μm濾膜過濾。

流速：1.0 mL/min。

檢測波長：220 nm。

柱溫：30℃。

進樣量：20 μL。

1.3試樣處理

稱取1g奶粉樣品于50mL具塞離心管中，加2mL水，渦旋30s，加2ml乙腈渦旋30s。再加入2mL乙腈，重復上述提取步驟。將該提取步驟重復2次，得到共計約10mL的提取液。以4000r/min離心5min，取2mL上清液加入雙氰胺凈化管上下晃動30s，然后渦旋30s后，4000r/min離心10min，取全部上清液(約10mL) 于玻璃試管中，50℃下氮氣吹干，加入50%乙腈水溶液，搖勻，過0.22μm微孔濾膜，，待測。

2 結果與討論

2.1 標準曲線的繪制

2.1.1 標準溶液配制

雙氰胺標準儲備液：準確稱取雙氰胺標準品10mg于10mL容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，此標準貯備液濃度為1mg/mL。

雙氰胺標準工作液： 吸取雙氰胺標準貯備液1mL于100mL容量瓶中，用乙腈定容配成標準溶液濃度為10μg/mL。再分別吸取10μg/mL雙氰胺標準溶液5.0、2.0、1.0、0.5、0.1mL于10mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，此標準工作液濃度為5.0、2.0、1.0、0.5、0.1μg/mL。

2.1.2 標準曲線

將雙氰胺標準工作液依次按上述色譜條件上機測定，記錄色譜峰面積。以峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。

圖1 雙氰胺標準曲線譜圖

2.2樣品分析

將樣品溶液按上述色譜條件上機測定，記錄色譜峰面積，計算含量。

圖2  1.0μg/mL標樣譜圖

圖2  1.0μg/mL標樣譜圖

圖3  某品牌奶粉添加1.0μg/g雙氰胺譜圖 

2.3 回收率實驗

在樣品中分別加入0.1、0.5、1.0mL的10μg/mL的標準溶液，按上述方法進行樣品處理，得到回收率如下表所示。

表1 回收率實驗

2.4 精密度實驗

相同的條件下，取三份樣品，分別加入0.5mL的10μg/mL的標準溶液，結果如下：

2.5 最小檢出限

以3倍的基線噪聲計算出檢出限為0.4mg/kg。

3 結論

用LC-5500高效液相色譜分析嬰幼兒奶粉中雙氰胺的含量，峰形良好，重復性良好，該方法在0.1～10.0 μg/mL濃度范圍內線性關系良好，回收率在95.1%～98.7%之間，滿足分析要求。

奶粉中雙氰胺檢測實驗系統配置

(高效液相色譜)

LC5500或LC5510(單泵)(或升級為雙泵，組成高壓梯度系統)

DM-100在線脫氣機(選配)

AS-401自動進樣器(選配)

溶劑過濾器(配備真空泵)

超聲波清洗器