可溶性抗原（如血清中的蛋白,組織浸出液,細胞裂解液等）與其相應的抗體在溶液中或凝膠中結合,若比例合適,可形成肉眼可見的抗原-抗體復合物,這就是免疫沉淀反應。免疫沉淀反應可以在小玻璃管中或毛細玻璃管及凝膠平板中進行。在用凝膠平板做實驗時,常用瓊脂糖凝膠做介質,有的加電流,使反應更快更靈敏。
一、環狀沉淀
【 實驗原理 】
在環狀沉淀試管中，當可溶性抗原與相應特異性抗體結合后，于兩者交界面處可形成白色沉淀環。此法系
Ascoli于1902年建立，用于檢查獸類內臟、皮毛浸液等標本中炭疽桿菌抗原，由于其較高的靈敏性和特異性，目前仍用于法醫學血跡鑒定、流行病學媒介昆蟲的吸血習性鑒定等。
【 實驗材料 】
待測血跡干燥紙片
抗人血清抗體、抗羊血清抗體和抗雞血清抗體
生理鹽水
環狀沉淀管及管架、吸管等。
【 實驗方法 】
1、取環狀沉淀管3支，分別加入抗人、抗羊和抗雞血清抗體各0.1ml 于管底部，并注明，置于管架上。
2、另取3支試管，分別將3種血跡紙片加入，再各加生理鹽水1ml，室溫5-10分鐘后將溶液搖勻。
3、吸取上清液分別加入上述含有抗人、抗羊、抗雞血清抗體的環狀沉淀管內，并使兩者形成一清晰交界面。置室溫下1-5分鐘觀察結果。
【 結果分析 】
根據是否與已知抗血清出現白色沉淀環，判定血跡類型。
【 注意事項 】
1、因血清分子密度及比重均大于生理鹽水，故當加入含有抗原的生理鹽水時只需將沉淀管傾斜，加抗原的吸管勿接觸抗血清，使含抗原的生理鹽水沿管壁緩緩流下，再將沉淀管直立即可呈一清晰交界面。
2、在加抗原時，吸管的頭部切勿觸及抗血清，否則不僅使抗原抗體混合，不能呈清晰交界面，而且如再用此吸管加抗原于另一支含不同抗血清的沉淀管后，必然會出現交叉反應，無法判定結果。
二 單向擴散
【 實驗原理 】
抗原或抗體這兩種成分中只有一種擴散，將已知抗體與瓊脂混合，將抗原
置于凝膠孔中，抗原則呈輻射狀擴散，在孔的周圍與抗體結合，在比例合適的地方形成肉眼可見的沉淀環。當抗體的濃度一定時，抗原的濃度與形成沉淀環的直徑成正比。
【 實驗材料 】
1% 瓊脂糖（瓊脂糖1g,0.1mol/L pH 8.6 巴比妥-巴比妥鈉緩沖液100ml），玻片或培養皿，凝膠打孔器（直徑3mm），水浴箱， 10ml 吸管， 5μl微量加樣器，已知抗體，標準抗原，待測抗原。
【 實驗方法 】
1 ） 取一張玻璃片，用水沖洗干凈，再用少量 75% 乙醇沖洗，晾干后置于水
平臺備用。
2 ）將 1% 瓊脂糖融化， 56 ℃水浴中保溫
3 ） 取 15ml 瓊脂糖加到 56 ℃預熱的玻璃管中，加入適量的抗體（約 200ml ）充分混勻后平鋪于玻璃片上。
4 ） 待凝膠凝固后打孔（直徑3mm）
5 ） 將系列稀釋的標準抗原和待檢抗原分別加到凝膠孔中，每孔 5 μ l
6 ） 將凝膠板置于濕盒，室溫過夜（24h 以上）后觀察結果。、
7 ）繪制標準曲線，測出樣品中相應抗原含量。
[ 結果分析 ]
1 本實驗主要用于檢查血型中 IgG ， IgA ， IgM 以及補體成分 C3 ， C4 等的含量 /
由于各類免疫球蛋白的分子量大小不等，因此同樣濃度的 IgG ， IgA ， IgM 在瓊脂糖中的擴散速度各異， IgG
擴散最快，形成的沉淀環直徑最大， IgM 的分子量最大，擴散速度慢，形成的沉淀環較小。
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形成的沉淀環大小與抗原或抗體的濃度相關，因此臨床檢測時應先調整抗體和抗原各自的最適濃度，抗體的最適濃度應使免疫擴散后的沉淀環邊緣清晰，且能測出血清中的免疫球蛋白的正常值和最大限度的異常值。抗體濃度過高，形成的沉淀環直徑小；濃度過低，不易檢測抗原的最高限濃度。沉淀環的大小與所檢測的抗原濃度成正比。抗原濃度過低時，沉淀環太小不易測定，過高時，沉淀環太大，浪費抗體。