0.前言
我國是一個缺水的農業大國，化肥的使用在農業生產中占重要地位，而傳統肥料存在利用率低、養分損失率高而且耗水量大的缺點，水溶肥料由于其迅速溶于水中、養分更易被吸收而且吸收利用率高并可應用于滴灌、噴施、噴灌的節水特點，在我國農業中有廣闊的發展前景[1]。氨基酸水溶肥作為水溶肥中的一員，其原理：氨基酸存在肥料中，易于被作物吸收的特點；亦有提高施肥對象抗病性，改善施肥作物品質的功能；補充植物必須的氨基酸，刺激和調節植物快速生長，促使植物生長健壯，促進對營養物質的吸收；增強植物的代謝功能，提高光合作用，促進植物根系發達，加快植物生長繁殖[2]。目前，對于氨基酸的檢測大多采用液相色譜、氣相色譜-質譜聯用、毛細管電泳、凱氏定氮法和光譜法等方法。這些方法或試劑費用昂貴，或分離效率低，或不能同時測多種氨基酸。運用氨基酸分析儀能解決以上問題，并且操作簡單方便，重復性好。
1.方法原理
含氨基酸水溶肥用磺基水楊酸沉淀蛋白質后，用EDTA絡合金屬元素釋放氨基酸，氨基酸經離子交換色譜分離、測定。脯氨酸在440 nm波長處有最大吸收峰，除脯氨酸外，其他各氨基酸均在570nm波長有最大吸收峰。因此，在440nm檢測計算脯氨酸含量，而在570nm檢測計算其它各氨基酸含量。
2.試劑與儀器
2.1試劑
6.0mol/l鹽酸溶液、茚三酮溶液、50g/L磺基水楊酸溶液、10g/L EDTA溶液、流動相：檸檬酸鈉緩沖液A=0.2N，pH=3.45；檸檬酸鈉緩沖液B=0.2N，pH=10.85；C=超純水；D=20g/L氫氧化鈉溶液。
2.2氨基酸混合標準儲備液
含天門冬氨酸、蘇氨酸等17種常規蛋白水解液分析用層析純氨基酸，各組分濃度C（氨基酸）=100nmol/ml。
2.3儀器與設備
sykam全自動氨基酸分析儀、0.45μm水洗濾膜、真空干燥箱、真空泵等。
3.實驗方法
3.1樣品前處理
稱取試樣2g-10g（精確到0.01g），置于250mI容量瓶中。充分溶解后，加水至刻度，混勻，放置過夜后吸取上清液（或過濾后吸取濾液）2ml，于10mL離心管，準確加人2mL磺基水楊酸溶液混勻，放置lh。準確加人1mLEDTA-Na溶液和1mL鹽酸溶液，混勻，用0.45μm的微孔濾膜過濾。吸取上清液（或濾液）1ml蒸干。準確加人1～5mL的樣品稀釋液溶解，使氨基酸濃度處于儀器最佳檢測范圍內，供儀器測定用[3]。
3.2儀器條件
色譜條件： LCAK06/Na （水解氨基酸分析柱）
柱溫：：58℃～74℃梯度控溫
洗脫泵：0.45mL/min；衍生泵：0.25mL/min
檢測器：440nm/570nm雙波長檢測器；反應器溫度：130℃；進樣體積：50μL
4.結果與分析
4.1氨基酸的色譜分析
圖1
試驗測定17種氨基酸標樣色譜圖見圖1，除PRO（脯氨酸）在440nm檢出，其余氨基酸都在570nm檢測出。連續進6針濃度為100nmol/L的氨基酸混合標樣，其平均分離度R=3.65，最小分離度R=1.41（Ile～Leu），18種濃度均為100nmol/L的氨基酸標液的峰面積的相對標準偏差見下表1。
峰面積相對標準偏差在0.150%～0.748%，說明此方法進樣重復性良好。
4.2回收率實驗
把已經稀釋3倍的氨基酸的混合標樣、氨基酸水溶肥進行測定，再把標液加入到樣品中檢測氨基酸含量，所得數據見下表2。
實驗的回收率在97.8%～101.3%之間，說明該方法具有較高的準確性。
5.結論
本文中使用氨基酸自動分析儀測定水溶肥中氨基酸的方法具有良好的重復性，較高的回收率，而且樣品分離度好，說明檢測氨基酸水溶肥料是可行的。