(1)、血液標本的采集、運送及貯存
①用一次性塑料采血器或硅化玻璃注射器，采靜脈血液。采血技術要熟練，不可過多損傷血管及周圍組織，致使組織液混入血液中。采血時止血帶不可束縛過緊，并不應超過2分鐘。針筒內見到回血即應解開止血帶，否則某些凝血及纖溶因子會活化，并可使血細胞比容(Hct)升高。
②靜脈采血1.8 ml，加入含有109 mmol/L枸櫞酸鈉溶0.2 ml的試管中，充分混勻。最好用已加有定量枸櫞酸鈉液的專用硅化真空采血管采血，以保證血與枸櫞酸鈉液比例準確，防止凝血因子活化，并保持清潔，防止不潔的試管和不合格橡皮塞的污染。
③貯血應用清潔塑料管或硅化玻璃管或其他不沾濕的容器，避免接觸活化凝血因子。取得血液后應盡快送到血液檢驗室。在運送中應避免劇烈振動和日光直射。一般要求自采血到測定不得超過4小時，不可久貯。如在室溫中貯存過久，V因子會破壞；另一方面，在4℃貯存過久，會導致第Ⅶ因子活化。實驗室在取得血樣后應盡快分離血漿并盡快測定。血液如發現凝固，應棄去不用。
(2)、將氯化鈣凝血活酶溶液，健康人混合凍于血漿和待測血漿，置37%水浴中預溫5分鐘。
(3)、取試管2支，分別加入待測血漿、健康人混合凍干血漿0.1 ml，37℃水浴預溫30秒，再加入預溫的25 mmol/L氯化鈣凝血活酶溶液0.2 ml，混勻，開動秒表計時。
(4)、不斷地傾斜試管至液體流動緩慢趨于停止時，終止計時，記錄所需時間。重復以上測定2-3次，取其平均值。
(5)、健康人混合凍干血漿的測定值應在11-13秒范圍，待測血漿PT值取2-3次的平均值報告。