一、材料、儀器設備及試劑
1. 材料:植物葉片。
2. 儀器設備:離心機,分光光度計,電子分析天平,恒溫水浴,研缽,試管,移液管(1 ml、5 ml)、試管架,移液管架,洗耳球,剪刀。
3. 試劑:10%三氯乙酸,0.6%硫代巴比妥酸(TBA)溶液,石英砂。
二、實驗步驟
1. 丙二醛的提取
稱取受干旱、高溫、低溫等逆境脅迫的植物葉片1g,加入少量石英砂和10%三氯乙酸2 ml,研磨至勻漿,再加8 ml10%三氯乙酸進一步研磨,勻漿以4000r/min離心10min,其上清液為丙二醛提取液。
2. 顯色反應及測定
取4支干凈試管,編號,3支為樣品管(三個重復),各加入提取液2 ml,對照管加蒸餾水2 ml,然后各管再加入2 ml 0.6%硫代巴比妥酸溶液。搖勻,混合液在沸水浴中反應15min,迅速冷卻后再離心。取上清液分別在532、600和450nm波長下測定吸光度(A)值。
三、丙二醛含量計算:
由于蔗糖-TBA反應產物的最大吸收波長為450nm,毫摩爾吸收系數為85.4×10-3,MDA-TBA反應產物在532nm的毫摩爾吸收系數分別是7.4×10-3和155×10-3。532nm非特異性吸光值可以600nm波長處的吸光值代表。
按雙組分分光光度法原理,建立方程組,解此方程組即可求出MDA及可溶性糖濃度。
方程組:

1.按下式計算提取液中MDA濃度
 2.按下式計算樣品中MDA含量
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