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    發布時間:2020-03-08 17:00 原文鏈接: 更快更安全的樣品制備

    IKA UTTD試管分散系統可對組織器官樣品進行快速處理。內置定轉子的分散管可迅速將組織樣品勻漿破碎,封閉式的樣品管取代開放式的試驗容器,一次性分散試管設計有效地避免交叉污染,免去清洗消毒等繁瑣工作。

    肝臟是機體中最大的實質器官,參與體內物質代謝和能量代謝,絕大多數藥物都要在肝臟進行生物轉化。病人處于肝移植手術無肝期階段時,麻醉藥物的代謝會受到不同程度的影響。傳統觀念認為此階段需減少麻醉藥物的用量,防止麻醉藥蓄積。近年來研究發現,肝移植手術無肝期階段麻醉藥物,如丙泊酚、羅庫溴銨等的藥代動力學并未發生明顯變化。由此推測可能存在麻醉藥的肝外代謝途徑或肝外代謝途徑功能增強的現象。

    麻醉藥有多條代謝途徑,其目的是將脂溶性的、有活性而無法排出的藥物轉變成水溶性、滅活的物質,從而能通過腎臟或膽道排出體外。在對樣品進行分析前,必須通過一些前處理手段把不同組織器官的細胞結構破壞,從而檢驗麻醉藥代謝的濃度分布。傳統的方法是用研缽對每種器官組織進行研磨破碎,再混懸于溶劑中,但此方法費時費力,重復性差,且容易造成交叉污染。

    德國IKA艾卡集團的UTTD試管分散系統可對此類樣品進行快速處理。內置定轉子的分散管可迅速將組織樣品勻漿破碎,封閉式的樣品管取代開放式的試驗容器,一次性分散試管設計有效地避免交叉污染,而且免去清洗消毒等繁瑣工作。帶穿孔膜蓋樣品管可供選擇,實現樣品的添加和取出。


    圖1.  所有試管都帶有穿孔膜蓋并且經過γ射線滅菌處理。

    儀器及試劑

    儀器:IKA ULTRA-TURRAX試管分散機(UTTD),含處理工具(定-轉子系管)。

    試劑:丙泊酚,PBS緩沖溶液。

    樣品:16只小白鼠。

    樣品處理

    選取小白鼠16只,分別從尾靜脈單次注射丙泊酚30 mg/kg, 從給藥結束開始計時,按給藥后1min,2 min,3min,4min,5min,6min,7min,8min,9min,10min,15min,20min,30min,40min,50min,60min各取1只小鼠。分離出每個時間點小鼠的肝臟、肌肉、腦、肺、胃、腸等組織,用手術刀剪取每樣1g組織,分別放入不同的20ml定轉子分散管中,加入5ml PBS緩沖溶液。樣品溶液分別放入IKA UTTD控制型試管分散機中進行3min、6000RPM的處理,處理完成后利用注射器穿刺分散試管膜蓋抽取樣品進行分析。

    UTTD系統采用封閉式的樣品管取代開放式的試驗容器,獨立于分散主機可使用戶免于與樣品進行直接接觸。測試結束后,有信號提醒測試完成,樣品可保存在樣品管內同其他器件一同進行下一步分析。


    圖2.  樣品制備各個階段的圖像。

    結果

    通過樣品前處理,獲得了均一的組織液體,效果非常理想,可以直接在高效液相色譜中進行不同組織中丙泊酚濃度的測定,并采用藥代軟件計算藥代參數。

    小結

    在UTTD試管分散機的幫助下,實現對樣品的快速預處理,得出丙泊酚在不同組織中的峰濃度分布情況,提高了實驗效率。由于試管分散機采用一次性試管設計,最大程度地避免交叉污染,從而保證了實驗結果的準確性和可靠性。


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