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    發布時間:2013-04-01 15:40 原文鏈接: 昆明植物所建立全新植物基因鏈接與克隆系統

      隨著高通量測序技術的普及與基因組信息爆炸式的增長,解析基因與基因組孕藏的功能信息成為我們了解生命密碼的必需步驟。功能基因研究是破解基因組信息這部天書的重要手段之一,而功能基因的研究離不開載體的構建與轉基因方法。傳統的載體構建耗時耗力,伴隨著煩瑣的酶切與連接手段,成功地構建一個用于植物轉化的載體往往需要幾天甚至幾個星期的時間,有時操作人員因為找不到適合的酶切位點而頭痛不已,這些都是限制功能基因研究的瓶頸問題。

      為了克服以上問題, 中國科學院昆明植物研究所胡向陽研究組的王春濤博士與博士生孔翔祥等人員,基于TA克隆技術建立了一套全新的基因連接與克隆系統。這一套系統完全克服了傳統克隆過程中上述難題,而且具有操作簡易、高效、穩定等特點。研究組成員將這套系統成功地運用到水稻與擬南芥的原生質轉化與蛋白細胞定位方面,以及擬南芥穩定轉化等功能基因研究。一系列的證據表明利用這套系統構建的載體,目標基因可以穩定高效地在擬南芥中表達,獲得的轉基因材料可以用于下一步的生理生化與功能分析。

      上述研究結果以A series of TA-based and zero-background vectors for plant functional genomics為題發表在《公共科學圖書館-綜合》(PLoS ONE)上,該研究工作得到中國科學院“百人計劃”項目、國家自然基金等項目的資助。

    利用TAT克隆構建瞬時表達載體


    瞬時表達載體在擬南芥與水稻原生質中表達

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