手性HPLC峰面積計算ee值：測定ee值不需要標準品的啊，只需要手性柱把兩個異構體分開，然后兩個峰面積之差除以兩者峰面積之和即可。
首先用手性柱測試外消旋標準品，測試兩個對映異構體的峰面積比例（一般1：1，也有不成1：1的）。根據這個比例測定樣品ee值。沒有標準品，做手性柱，出現兩個峰的峰面積之比就是ee值，不需要標準品，做HPLC是要標準品來做標準曲線的。
例如
一個化合物的比旋測得值為—16.3(c0.97，MeOH)，又已知該化合物絕對純的比旋值為—17．9(c1.16，MeOH)，那么這化合物的光學純度即e.e.值等于16．3/17．9×100%，為91%。如前所述，通過比旋的測定，得到的光學純度就是對映體過量的百分數，前提是在特定的條件下，用純的樣品小心地讀數。用旋光法測量的對映體過量值應由另一個獨立的方法加以確認。
