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    發布時間:2020-05-29 17:09 原文鏈接: 快速了解動物血標本采集步驟

      一、《細胞及血液樣本采集操作指南》(gDNA)

      培養細胞

      1. 培養細胞用細胞瓶,須加滿培養基后,常溫運輸。

      血液

      1. 已加入抗凝劑(選擇用 EDTA-、檸檬酸-、ACD 等抗凝,不要用肝素抗凝)的新鮮 全血,常溫運輸。 注意事項 1. 我們不接收裂解的細胞樣本以及全血樣本。

      2. 所有樣本均應標明準確的樣本編號,同時配有一張樣本登記表,寫明樣本名稱、 種類、編號、取樣日期、樣本處理情況等。

      細胞及血液樣本采集操作指南

      細胞及血液樣本采集操作指南

      二、《組織樣本采集操作指南》(gDNA)

      (1)動物組織

      1. 首先準備好用于包裝樣本的鋁箔或冷凍保存管,并且用油性記號筆在鋁箔或凍存 管外表多處寫明樣本編號。

      2. 準確切除所需組織后,立即剔除結締組織和脂肪組織等非研究所需的組織類型。 3. 在生理鹽水中迅速漂洗樣本,以去除血漬和污物。

      4. 用準備好的鋁箔或冷凍保存管裝載包裹組織,迅速投入液氮冷卻。

      5. 填寫樣本登記單,寫明樣本名稱、組織類型、編號、取樣日期、樣本處理過程等 情況。

      (2)臨床標本

      1. 準確切除所需組織后,立即投入液氮冷凍。

      2. 用準備好的鋁箔或冷凍保存管裝載包裹組織。

      3.樣品操作最好在冰上進行。

      4. 填寫樣本登記單,寫明樣本名稱、組織類型、編號、取樣日期、樣本處理過程等情況。

      (3)植物組織

      1. 準確取得所需組織后,立即用準備好的鋁箔包裹組織。

      2. 立即投入液氮冷凍。

      3. 填寫樣本登記單,寫明樣本名稱、組織類型、編號、取樣日期、樣本處理過程等 情況。

      (4)注意事項

      1. 如用液氮罐存放樣品包裹組織的鋁箔或冷凍保存管轉入樣本袋時,請按以下步 驟進行:把樣本袋(紗布袋等)放入液氮中冷凍一下,而后將液氮冷卻的組織放 入樣本袋(每個樣本袋只保存同樣的組織,樣本較多時應分裝至多個小袋,不要在一只樣本袋中放過多的樣本以防無法放入液氮罐或無法從液氮罐中取出) 袋口 , 留一根編號繩,繩上粘 2 張標簽紙(標簽上注明:客戶名、樣本名稱、編號、日 期,粘 2 張標簽紙是為了防止標簽脫落造成樣本混亂) ,迅速轉入液氮罐。

      2. 如用廣口容器液氮暫存建議用進口高質量凍存管,油性筆標記后,樣品迅速 放入管中,擰緊后迅速放入液氮中。然后再轉移到超低溫冰箱中保存。

      3.直接干冰中保存并郵寄的建議全部用進口凍存管,油性筆標記后,樣品迅速放 入經干冰預冷的凍存管中,放入樣品袋,埋入干冰中,密封包裝后,運輸。 對于液氮保存樣品,務必注意: 不要用 Eppendorf 管,因為 Eppendorf 管從液氮中取出時極易發生管子爆裂而造成 樣本損失。 不要用國產凍存管, 因為國產凍存管從液氮中取出時也常發生爆裂, 可能造成樣品 損失或傷人。

      細胞及血液樣本采集操作指南

      三、《基因組 DNA 樣本采集操作指南》(gDNA)

      基因組 DNA 1. 如果提供基因組 DNA 樣本, 要求電泳條帶清晰, 沒有拖尾, 濃度大于等于 50ng/μl, OD260/280 在 1.8 左右。

      四、樣本量

      1. 2. 3. 4. 5. 對于正常未經特殊處理的培養細胞,細胞量要求至少 1*107。 正常人抗凝血液樣本,體積 0.5ml 以上。 新鮮正常組織,25mg 以上。 基因組 DNA 總量 1 微克以上。 對于癌癥或經過特殊處理的樣本,要求量以實際抽提量為準。

      強烈建議 為確保實驗的順利, 我們強烈建議您在取樣時, 應同時備份 2~3 份, 如備份 3 份, 則送給我們兩份,如果備份 2 份,則送樣一份,您自己留一份,以防備部分樣品 降解,重新取材或送樣將耽誤您的時間。即使樣品全部合格,備份的樣品您還可 以用來進行其他方面的實驗(如定量驗證,蛋白方面,生化方面的實驗等) 。 備份又分為兩種,一種為嚴格備份,即:樣品取下后一分為二,這樣的兩份樣品 基本上具備 同性質。另一種為非嚴格備份,即生物學重復的樣品,這樣的備份樣品同質性要 較前者差。

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