實驗方法原理
直接測量己糖激酶的反應：
D-葡萄糖＋ATP → 6-磷酸葡萄糖＋ADP
簡單的光度測量是達不到的，葡萄糖的磷酸化最好用測量磷酸或者 ATP32 標記的辦法。由于通過層析，G6P 的實驗必須完全與 ATP 和 ADP 分開，因此，建議應用 HPLC 方法。酶的實驗通常是酶與 G6P 脫氫酶反應偶聯:
D-6-葡萄糖＋ATP＋NADP＋ → 6-磷酸葡萄糖＋ADP＋NADPH＋H＋
這些反應都已經通過光度測量實現。當使用這個偶聯的系統，首先應該單獨進行 G6P 反應實驗，然后在己糖激酶的存在下用葡萄糖和 ATP 取代 G6P 繼續反應。
實驗材料 己糖激酶
試劑、試劑盒 三乙醇胺-HCl NaOHD-葡萄糖ATPMgCl2NADP6-磷酸葡萄糖脫氫酶
儀器、耗材 分光光度計
實驗步驟
實驗所需「試劑」具體見「其他」
0.98 ml 實驗混合物
0.02 ml 酶樣品
25℃ 時，于 340 nm 處吸收值升高，ε340＝6.3×103 l/（mol·cm）。
注意事項
其他
試劑：
100 mmol/L 三乙醇胺-HCl/NaOH，pH 7.6（三乙醇胺-HCl，用 1 mol/L NaOH 調節）
1.0 mol/L D-葡萄糖（Mr＝180.2；18 g/100 ml）
0.1 mol/L ATP（二鈉鹽，三水合物，Mr＝605.2；605 mg 溶于 10 ml 水）
0.1 mol/L MgCl2（六水合物，Mr＝203.3；203 mg 溶于 10 ml 水中）
0.01 mol/L NADP（二鈉鹽，Mr＝787.4；79 mg 溶于 10 ml 水中）
6-磷酸葡萄糖脫氫酶（商業品有 100～500 U/mg，準備時稀釋至大約 5U/0.1 ml）