氣體是哺乳動物細胞培養生存必需條件之一，所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。氧氣參與三羧酸循環，產生供給細胞生長增殖的能量和合成細胞生長所需用的各種成分。開放培養時一般把細胞置于95%空氣加5%二氧化碳混合氣體環境中。
二氧化碳既是細胞代謝產物，也是細胞生長繁殖所需成分，它在細胞培養中的主要作用在于維持培養基的pH值。數細胞的適宜pH為7.2-7.4，偏離這一范圍對細胞培養將產生有害的影響。
但細胞耐酸性比耐堿性大一些，在偏酸環境中更利于細胞生長。但有一些細胞也喜歡偏堿環境中生長，如成纖維細胞最適合pH是7.4-7.6。每種細胞都有其最適pH值。