隨著醫學檢驗技術的發展,越來越多的檢測項目被應用到臨床診療當中,為了提高診斷的正確性,降低誤診率,臨床醫生可能會針對同一指標或病癥,開具多種檢測。但由于各種檢測方法之間存在一定的差別,它們的結果可能會出現不一致,甚至截然相反的現象,我在參加內科早查房時,就有臨床醫生向我提出了這種疑問。
臨 我能冒昧的問你個問題么? 我 您說。
臨 你們科做的尿液分析報告里面有兩個紅細胞和白細胞,為什么有時候這倆結果會出現一個陽性、一個陰性啊?我們該信哪一個? 我 這兩個紅細胞和白細胞,分別來自尿干化學和尿沉渣(或鏡檢),其檢測原理和方法不一樣。另外,也有一些外界的干擾因素可能會對結果產生干擾,需要根據具體情況分析。
兩種方法的檢測原理不同
1.尿干化學
尿干化學一般是用多聯試帶檢測的。該試帶以濾紙為載體,將各種試劑成分分別浸到不同的濾紙塊中,再把不同的濾紙塊固定在不被尿液浸潤的塑料帶上組成多聯試帶。
檢測時,只需將多聯試帶浸入到尿液之中,尿液中相應的成分與濾紙塊中的試劑發生反應,導致濾紙塊顏色發生變化,尿干化學分析儀根據顏色變化的程度對尿液中相應的成分進行半定量測定。
第一層:尼龍膜,起保護作用;
第二層:絨制層,包括碘酸鹽層(破壞維生素C的干擾)和試劑層(與尿液所測物質發生反應);
第三層:吸水層,使尿液快速均勻的浸入并抑制其流到相鄰試紙塊;
第四層:塑料底層,作為載體。
白細胞的檢測原理:采用的是白細胞酯酶法。中性粒細胞中存在酯酶,可與試紙塊中的吲哚酚酯反應產生吲哚酚,后者可與重氮鹽反應形成紫色縮合物,試紙塊顏色由黃變紫。
紅細胞(隱血)的檢測原理:采用的是血紅蛋白類過氧化物酶法。血紅蛋白類過氧化物酶催化試紙塊中的過氧化氫烯鈷和色素原四甲替聯苯胺(或鄰甲聯苯胺),后者脫氫氧化而呈色,顏色深淺與血紅蛋白或紅細胞含量成正比。
2.尿沉渣
尿沉渣(或鏡檢)是根據尿液中有形成分的內部或外部性質,由設備或檢驗人員對其進行判斷并分類。目前自動化尿沉渣檢測設備檢測紅細胞和白細胞的原理主要有兩種:基于流式細胞術或模擬人工鏡檢。
流式細胞術是將細胞懸浮于鞘液中,通過噴嘴排出,然后用激光照射在細胞上,這會產生散射光。前向散射光反映細胞的體積大小,側向反射光反映細胞表面和內部的狀況,由此,可將紅細胞、白細胞等有形成分識別并計數。有的設備還可以對細胞成分進行熒光染色以提高識別的準確度。
而模擬人工鏡檢的設備則是吸入一定量體積的尿液后離心,灌入到計數板中,用自帶的顯微鏡對計數板中不同位置進行拍照,并將所拍得的有形成分與數據庫中的信息進行比對,可以識別出紅細胞、白細胞等形態并按照所吸入的尿量體積自動計數。當然,設備對于尿液有形成分的識別也非萬無一失的,一些復雜的結果需要人工核對。
一般來說由設備進行檢測得到的結果具有較高的一致性,甚至可以量化。有的醫院不使用自動化設備進行尿沉渣檢測,而是人工鏡檢,其結果較依賴檢驗人員的水平和經驗,且多數結果為描述性報告,如「2+」、「滿視野」、「11-15/HP」。
當兩種檢測方法檢測結果沖突時,如何分析?
對于臨床醫生反映兩種方法結果不一致的現象,在保證結果質量的前提下,可分為以下幾種情況進行分析:
1.白細胞:干化學(+)、鏡檢(-)
尿液樣本留取后未能及時送檢、送檢后未及時檢測,或者尿液在膀胱中留存時間過長,導致白細胞被破壞,白細胞酯酶被釋放到尿液中。尿液中的白細胞酯酶與試紙塊反應使干化學法呈陽性,而鏡檢無法找到白細胞而呈假陰性。
2. 白細胞:干化學(-)、鏡檢(+)
干化學法采用的白細胞酯酶,只存在于中性粒細胞中,而淋巴細胞和單核細胞中不具有這種酶,故當尿液中的白細胞為此二類細胞時(如腎移植后發生排斥反應),不與試紙塊中的試劑發生反應,干化學法呈現假陰性結果。
3.紅細胞(隱血):干化學(+)、鏡檢(-)
干化學法既可檢測尿液中完整的紅細胞,又可檢測血紅蛋白,故當尿液中的紅細胞破壞之后(如尿液樣本存放時間過長),顯微鏡鏡檢難以找到紅細胞使鏡檢結果呈現假陰性;而血紅蛋白與干化學試紙塊發生反應呈陽性。另外,當尿中含有肌紅蛋白時(如橫紋肌溶解綜合征、溶血性疾病),也可使干化學隱血出現陽性反應,而鏡檢為陰性。
4.紅細胞:干化學(-)、鏡檢(+)
根據筆者工作幾年的經驗,此種情況較為少見,可能是由于尿液中僅含有少量的紅細胞,不能引起干化學法明顯的反應,或者尿液中含有大量的還原性物質(如維生素C),競爭性抑制了血紅蛋白與試紙塊中試劑的反應而出現了假陰性。
5.其他因素。
總結
科學技術飛速發展,新技術不斷的被應用到醫學檢驗中,但是這并不代表老技術就過時須被淘汰了。
尿液分析中,尿液干化學和尿沉渣檢測(或鏡檢)相輔相成,互相支持,不存在孰優孰劣之分。
我們檢驗人員在審核發布報告時,應橫向和縱向對比患者的報告單綜合分析,橫向可以對比本報告單相關項目以及與此次檢查一同檢測的其他報告單,如尿膽紅素陽性可對比患者肝功中的總膽紅素、直接膽紅素是否相符;縱向可對比患者同一項目的多次檢測結果是否符合病情發展。