實驗室專用 ELISA檢測試劑盒技術原理:
(1)抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2)結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
(3)酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
(4)受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
(5)此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
(6)加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
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注意事項:
1.不同廠家生產的試劑盒因生產工藝和操作方法略有不同,務必按照所用試劑盒嚴格操作,否則容易產生檢測結果的不確定性.
2.若不同批號人ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進行交叉使用,有可能出現顯色淺或本底高,花板等情形。
3.反應時間的誤差,做大量標本時,第一孔和最后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
4.臨界值附近標本波動為正常現象,任何試劑均不可避免。可以考慮將標本做奇數次復檢。
5.加樣時樣品量誤差,對于陰或很陽的標本影響不大,但對閾值附近的標本影響極大,建議校對加樣器。