對光選擇吸收性質的差異檢查藥物雜質探析

　　藥物中所含有的雜質可分為無機雜質如氯化物、硫酸鹽、硫化物、氰化物和重金屬等；有機雜質比如有機藥物中引入的原料、中間體、副產物、分解物、異構體和殘留溶劑等。按雜質的來源可為一般雜質和特殊雜質。一般雜質是指在自然界中分布較廣泛，在多種藥物的生產或貯藏過程中容易引入的雜質，如酸、堿、水分、氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬和砷鹽等；特殊雜質是指在該藥物的生產和貯藏過程中，根據其性質和一定的生產方法與工藝條件下有可能引入的雜質，如甲丙氨酯要檢查氰化物，甲硝唑要檢查2-甲基-5-硝基咪唑，因此，藥物中可能引入的特殊雜質，要根據藥物品種的不同而異。基于物質的對光選擇吸收性質，按朗伯-比耳定律進行的分光光度法，其優點為靈敏度較高，儀器較普遍，常用于微量物質的測定。因此，如藥物在紫外光區或可見光區無吸收而雜質有吸收，或在雜質吸收峰處藥物無吸收，則雜質可被檢出，所以分光光度法在雜質限量檢查方面，應用日益廣泛。 
　　1 目視法直接比較或者用分光光度計測定吸收度 
　　藥物中所含雜質與試劑反應后呈現出顏色與定量雜質對照品經同法處理后所呈的顏色，用目視法直接比較或用分光光度計測定吸收度。如維生素K1中檢查甲萘醌，具體操作是：取供試品20mg，溶于三甲基戊烷，加氨試液-乙醇（1：1）溶液，如含有甲萘醌，與氰基醋酸乙酯作用，生成化合物而顯藍色。與甲萘醌的三甲基戊烷溶液20ml用同一方法制成的對照溶液檢查比較，不得更深。由于雜質檢查屬于限量檢查，目視比色法一般能達到要求，方法又簡便，因此，使用較多。也可將供試品處理后使雜質顯色，于一定波長處測定，規定其吸收度值，從而控制雜質限量。如氫氯噻嗪中檢查芳伯胺，將供試品溶解于兩酮，加稀鹽酸與亞硝酸鈉進行重氮化，加氨基磺酸銨分解去除剩余的亞硝酸后，與二鹽酸萘基乙二胺偶合顯色，以無水丙酮經同法處理后作為空白，用1cm吸收池，于518±1nm波長處測定，吸收度不得超過010。 
　　2 紫外分光光度法測定 
　　藥物中所含雜質在紫外光區有選擇吸收者，可用紫外分光光度法測定。如腎上腺素中檢查腎上腺酮，后者在310nm波長處有最大吸收，而腎上腺素在此波長無吸收波長處測定，吸收度不得超過005，用以控制腎上腺酮限量。又如吡喹酮在320nm波長處無吸收，而雜質在此波長有一平坦的吸收峰，如雜質吸收度較高時，可影響本品含量偏高，外觀色澤微黃。當本品005mg/ml的乙醇溶液，在320nm波長的吸收度小于005時，含量測定結果符合含量限度規定，所以取含量測定項下溶液，檢查雜質吸收度，不得超過005。 
　　3 原子吸收分光光度法 
　　利用藥物中所含待檢元素的原子蒸氣，吸收發自光源的該元素的特定波長的輻射能，使原子中的電子波被激發，由較低級躍遷到較高能級，即原子由基態躍遷到激發態。測定基態原子對輻射能的吸收程度，從而求出供試藥物中待檢元素含量的方法，是為原子吸收分光光度法。或利用原子中被激發的電子由高能級回到低能級時，將多余的能量以光的形式發射出，測定發射光的強度，以求得待檢元素含量的方法，稱為火焰光度法。原子吸收分光光度法所用儀器為原子吸收分光光度計，它由光源、原子化器、單色器和檢測器等部分組成，其中光源和原子化器有別于其它分光光度計，光源通常用待檢元素作為陰極的空心陰極燈，原子化器由霧化器及燃燒燈頭組成。燃燒火焰由不同類型的氣體混合物產生，常用空氣-乙炔火焰。儀器某些工作條件如波長、狹縫、光源燈電流、火焰類型、火焰狀態的變化等可影響靈敏度和穩定度。關于原子吸收分光光度法的原理、方法和干擾因素等。因此火焰光度法多用于測定藥物中所含堿金屬和堿土金屬雜質，測定所用對照品應為光譜分析純，所用水為去離子水。用原子吸收分光光度法考察藥物中所引進的元素雜質，具有靈敏度高，選擇性好等諸多優點。 
　　4 紅外分光光度法檢查 
　　某些多晶型藥物由于其晶型結構不同，某些化學鍵的鍵長、鍵角等發生不同程度的變化，可以導致紅外光譜中的某些特征的頻率、峰形和強度出現顯著差異，因此用紅外吸收分光光度法檢查藥品中低效晶型，其結果可靠，方法簡便。如中國藥典用本法檢查甲苯咪唑中A晶型，方法為取供試品與含10%A晶型的甲苯咪唑對照品各約25mg，分別加液狀石蠟研磨均勻，制成厚度約015mm的石蠟糊片，同時制作厚度相同的空白液狀石蠟糊片作參比，用紅外分光光度法測定并調節供試品與對照品在803cm-1波長處的透光率為90-95%，分別記錄620-803cm-1波數范圍的紅外吸收圖譜。在約640和803cm-1波數處的最大吸收峰頂處作垂線使與基線相交，從而得到此二波數處的最大吸收峰的校正吸收值，由于在640cm-1波數處A晶型有強吸收，C晶型的吸收很弱；在662cm-1波數處A晶型的吸收很弱，而C晶型有較強吸收。設含有10%A晶型的甲苯咪唑對照品在640cm-1波數處的校正值為D1，在662cm-1波數處的校正值為D2，其比值R=D1/D2；供試品在640cm-1波數處的校正值為D1‘；在662cm-1波數處的校正值為D2’，其R’=D1‘/ D2’，R’應當小于R，則本品中的A晶型在10%以下。此外，無味氯霉素混懸劑中A晶型也用紅外分光光度法檢查。