在《抗體工程》上有親和力常數的測定方法,如平衡透析、競爭結合、熒光增強法、硫氰酸鹽洗脫法、ELISA和固相放射免疫測定法(SPRIA)等。其中ELISA和SPRIA是最敏感的檢測方法。通常采用競爭結合以及Scatchard作圖法。如果有條件用SPR方法,這是目前國際上流行的方法,該方法靈敏,客觀。
另外測親和力之前最好先測定抗體的有效濃度,方法是夾心法,用標準免疫球蛋白做標準品。因為在作OD-抗體濃度曲線時如果抗體濃度不夠,做不出來好的S形曲線,達不到最高值。所以建議你先測定抗體的濃度。如果濃度較低的話,你可以濃縮一下,方法很多,如PEG法,真空冷凍干燥,超速離心等等。