如何促進4T1小鼠乳腺癌細胞貼壁
1. 適度消化細胞:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養基打散。
2. 用塑料瓶培養,如果是玻璃瓶,那么可以用鼠尾膠原包被一下培養瓶,或者用鹽酸對培養瓶進行蝕刻,或者涂Laminin/fibronectin/collagen/BSA,也可以幫助細胞貼附新的培養瓶,細胞不易貼壁,建議加多聚賴氨酸處理。
3. 正確配制消化液或培養液。
4. 使用合適的細胞外基質或貼壁試劑。
5. 復蘇新的細胞,D一周用20%血清幫助細胞復原。
6. 傳代接種一定要鋪的均勻,避免細胞抱團生長。
7. 細胞傳代24小時之內,不要晃動,以免影響貼壁。
8. 體內上皮細胞生長在膠原構成的基膜上,因此培養在有膠原的底物上有利于生長。人或小鼠表皮細胞培養,可以用γ射線照射后的3T3細胞為飼養層,另外降低pH、Ca2+含量和溫度,均有利于上皮細胞生長。
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